ការសាកសួរព័ត៌មាន

Phosphorylation ធ្វើឱ្យសកម្មនិយតករកំណើនមេ DELLA នៅក្នុង Arabidopsis ដោយលើកកម្ពស់ការផ្សារភ្ជាប់នៃអ៊ីស្តូន H2A ជាមួយក្រូម៉ាទីន។

ប្រូតេអ៊ីន DELLA ត្រូវបានអភិរក្សមេនិយតករកំណើនដែលដើរតួនាទីសំខាន់ក្នុងការគ្រប់គ្រងការអភិវឌ្ឍន៍រោងចក្រ ដើម្បីឆ្លើយតបទៅនឹងកត្តាខាងក្នុង និងបរិស្ថាន។ DELLA ដើរតួជានិយតករប្រតិចារិក ហើយត្រូវបានជ្រើសរើសទៅកាន់អ្នកផ្សព្វផ្សាយគោលដៅដោយភ្ជាប់ទៅនឹងកត្តាចម្លង (TFs) និង histone H2A តាមរយៈដែន GRAS របស់វា។ ការសិក្សាថ្មីៗបានបង្ហាញថាស្ថេរភាព DELLA ត្រូវបានគ្រប់គ្រងក្រោយការបកប្រែតាមរយៈយន្តការពីរ៖ polyubiquitination បង្កឡើងដោយ phytohormone gibberellin ដែលនាំទៅដល់ការរិចរិលយ៉ាងឆាប់រហ័សរបស់វា និងការរួមផ្សំនៃកម្មវិធីកែប្រែតូចៗដូច ubiquitin (SUMO) ដើម្បីបង្កើនការប្រមូលផ្តុំរបស់វា។ លើសពីនេះ សកម្មភាព DELLA ត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយថាមវន្តដោយ glycosylations ពីរផ្សេងគ្នា៖ អន្តរកម្ម DELLA-TF ត្រូវបានពង្រឹងដោយ O-fucosylation ប៉ុន្តែត្រូវបានរារាំងដោយការកែប្រែ O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ តួនាទីរបស់ DELLA phosphorylation នៅតែមិនច្បាស់លាស់ ដូចដែលការសិក្សាពីមុនបានបង្ហាញពីលទ្ធផលដែលផ្ទុយគ្នា ចាប់ពីអ្នកដែលបង្ហាញថា phosphorylation ជំរុញ ឬកាត់បន្ថយការរិចរិលរបស់ DELLA ដល់អ្នកដទៃដែលបង្ហាញថា phosphorylation មិនប៉ះពាល់ដល់ស្ថេរភាពរបស់វា។ នៅទីនេះយើងកំណត់ទីតាំង phosphorylation នៅក្នុង REPRESSORហ្គា១-៣(RGA, AtDELLA) បន្សុតពី Arabidopsis thaliana ដោយការវិភាគវិសាលគមធំ ហើយបង្ហាញថា phosphorylation នៃ RGA peptides ពីរនៅតំបន់ PolyS និង PolyS/T លើកកម្ពស់ការចង H2A និងសកម្មភាព RGA ប្រសើរឡើង។ សមាគមនៃ RGA ជាមួយអ្នកផ្សព្វផ្សាយគោលដៅ។ គួរកត់សម្គាល់ថា phosphorylation មិនប៉ះពាល់ដល់អន្តរកម្ម RGA-TF ឬស្ថេរភាព RGA ទេ។ ការសិក្សារបស់យើងបង្ហាញពីយន្តការម៉ូលេគុលដែល phosphorylation ជំរុញសកម្មភាព DELLA ។
ដើម្បីបញ្ជាក់តួនាទីនៃ phosphorylation ក្នុងការគ្រប់គ្រងមុខងារ DELLA វាជារឿងសំខាន់ក្នុងការកំណត់ទីតាំង phosphorylation DELLA នៅក្នុង vivo និងធ្វើការវិភាគមុខងារនៅក្នុងរុក្ខជាតិ។ ដោយការបន្សុតភាពស្និទ្ធស្នាលនៃសារធាតុចម្រាញ់ពីរុក្ខជាតិតាមពីក្រោយដោយការវិភាគ MS/MS យើងបានកំណត់អត្តសញ្ញាណផូស្វ័រជាច្រើននៅក្នុង RGA ។ នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃកង្វះ GA, RHA phosphorylation កើនឡើង ប៉ុន្តែ phosphorylation មិនប៉ះពាល់ដល់ស្ថេរភាពរបស់វាទេ។ សំខាន់ ការវិភាគ co-IP និង Chip-qPCR បានបង្ហាញថា phosphorylation នៅតំបន់ PolyS/T នៃ RGA លើកកម្ពស់អន្តរកម្មរបស់វាជាមួយ H2A និងការផ្សារភ្ជាប់របស់វាជាមួយអ្នកផ្សព្វផ្សាយគោលដៅ ដោយបង្ហាញពីយន្តការដែល phosphorylation បង្កើតមុខងារ RGA ។
RGA ត្រូវបានជ្រើសរើសដើម្បីកំណត់គោលដៅ chromatin តាមរយៈអន្តរកម្មនៃដែនរង LHR1 ជាមួយ TF ហើយបន្ទាប់មកភ្ជាប់ទៅ H2A តាមរយៈតំបន់ PolyS/T និងដែនរង PFYRE របស់វា បង្កើតជាស្មុគស្មាញ H2A-RGA-TF ដើម្បីធ្វើឱ្យ RGA មានស្ថេរភាព។ Phosphorylation នៃ Pep 2 នៅក្នុងតំបន់ PolyS/T រវាងដែន DELLA និងដែន GRAS ដោយ kinase មិនស្គាល់អត្តសញ្ញាណ បង្កើនការចង RGA-H2A ។ ប្រូតេអ៊ីន mutant rgam2A លុបបំបាត់ RGA phosphorylation និងទទួលយកការអនុលោមតាមប្រូតេអ៊ីនផ្សេងគ្នាដើម្បីរំខានដល់ការភ្ជាប់ H2A ។ នេះបណ្តាលឱ្យមានអស្ថិរភាពនៃអន្តរកម្ម TF-rgam2A បណ្តោះអាសន្ន និងការផ្តាច់នៃ rgam2A ពីក្រូម៉ាទីនគោលដៅ។ តួលេខនេះបង្ហាញតែការគាបសង្កត់ការចម្លងតាម RGA ដែលសម្របសម្រួលប៉ុណ្ណោះ។ គំរូស្រដៀងគ្នានេះអាចត្រូវបានពិពណ៌នាសម្រាប់ការធ្វើឱ្យសកម្មប្រតិចារិកដែលសម្របសម្រួលដោយ RGA លើកលែងតែស្មុគស្មាញ H2A-RGA-TF នឹងជំរុញការចម្លងហ្សែនគោលដៅ និង dephosphorylation នៃ rgam2A នឹងកាត់បន្ថយការចម្លង។ រូបភាពដែលបានកែប្រែពី Huang et al.21 ។
ទិន្នន័យបរិមាណទាំងអស់ត្រូវបានវិភាគតាមស្ថិតិដោយប្រើ Excel ហើយភាពខុសគ្នាសំខាន់ៗត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើតេស្ត t របស់សិស្ស។ គ្មានវិធីសាស្រ្តស្ថិតិត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់ជាមុននូវទំហំគំរូទេ។ គ្មានទិន្នន័យត្រូវបានដកចេញពីការវិភាគទេ។ ការពិសោធន៍មិនត្រូវបានចៃដន្យ; អ្នកស្រាវជ្រាវមិនខ្វាក់ភ្នែកចំពោះការចែកចាយទិន្នន័យក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ និងការវាយតម្លៃលទ្ធផលនោះទេ។ ទំហំ​គំរូ​ត្រូវ​បាន​ចង្អុល​បង្ហាញ​ក្នុង​តួ​លេខ​និង​ឯកសារ​ទិន្នន័យ​ប្រភព។
សម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែមអំពីការរចនាការសិក្សា សូមមើល របាយការណ៍ផលប័ត្រធម្មជាតិ សង្ខេបដែលភ្ជាប់ជាមួយអត្ថបទនេះ។
ទិន្នន័យ proteomics spectrometry ដ៏ធំត្រូវបានរួមចំណែកដល់សម្ព័ន្ធ ProteomeXchange តាមរយៈឃ្លាំងដៃគូ PRIDE66 ជាមួយនឹងឧបករណ៍កំណត់អត្តសញ្ញាណសំណុំទិន្នន័យ PXD046004 ។ ទិន្នន័យផ្សេងទៀតទាំងអស់ដែលទទួលបានក្នុងអំឡុងពេលសិក្សានេះត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងព័ត៌មានបន្ថែម ឯកសារទិន្នន័យបន្ថែម និងឯកសារទិន្នន័យឆៅ។ ទិន្នន័យប្រភពត្រូវបានផ្តល់ជូនសម្រាប់អត្ថបទនេះ។

 

ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ០៨-វិច្ឆិកា-២០២៤