សំណួរ

ផូស្វ័រឡាស្យុងធ្វើឱ្យសកម្មនូវនិយតករលូតលាស់មេ DELLA ដែលជំរុញឱ្យមានការភ្ជាប់អ៊ីស្តូន H2A ទៅនឹងក្រូម៉ាទីននៅក្នុង Arabidopsis។

ប្រូតេអ៊ីន DELLA ត្រូវបានរក្សាទុកសារធាតុ​គ្រប់គ្រង​ការលូតលាស់ដែលដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់ក្នុងការអភិវឌ្ឍរុក្ខជាតិដើម្បីឆ្លើយតបទៅនឹងសញ្ញាខាងក្នុង និងខាងក្រៅ។ ក្នុងនាមជានិយតករប្រតិចារិក DELLA ភ្ជាប់ទៅនឹងកត្តាប្រតិចារិក (TFs) និងអ៊ីស្តូន H2A តាមរយៈដែន GRAS របស់ពួកគេ ហើយត្រូវបានជ្រើសរើសឱ្យធ្វើសកម្មភាពលើប្រូម៉ូទ័រ។ ការសិក្សាថ្មីៗបានបង្ហាញថាស្ថេរភាព DELLA ត្រូវបានគ្រប់គ្រងបន្ទាប់ពីការបកប្រែដោយយន្តការពីរ៖ ពហុយូប៊ីគីទីនដែលបង្កឡើងដោយអរម៉ូនរុក្ខជាតិជីបប៊ែរលីនដែលនាំឱ្យមានការរិចរិលយ៉ាងឆាប់រហ័សរបស់ពួកវា និងការភ្ជាប់ជាមួយនឹងសារធាតុកែប្រែដូច ubiquitin តូចៗ (SUMO) ដែលបង្កើនការប្រមូលផ្តុំរបស់ពួកវា។ លើសពីនេះ សកម្មភាព DELLA ត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយថាមវន្តដោយយន្តការ glycosylation ពីរផ្សេងគ្នា៖ O-fucosylation បង្កើនអន្តរកម្ម DELLA-TF ខណៈពេលដែលការកែប្រែ N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ដែលភ្ជាប់ជាមួយ O រារាំងអន្តរកម្ម DELLA-TF។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ តួនាទីរបស់ phosphorylation DELLA គឺមិនច្បាស់លាស់ទេ ដោយសារការសិក្សាពីមុនបានបង្ហាញលទ្ធផលផ្ទុយគ្នា ដោយខ្លះបានបង្ហាញថា phosphorylation ជំរុញ ឬបង្ក្រាបការរិចរិល DELLA និងខ្លះទៀតបង្ហាញថា phosphorylation មិនប៉ះពាល់ដល់ស្ថេរភាពរបស់ពួកវាទេ។ នៅទីនេះ យើងកំណត់អត្តសញ្ញាណកន្លែង phosphorylation នៅក្នុង GA1-3 repressor (RGA) AtDELLA ដែលបានបន្សុទ្ធពី Arabidopsis thaliana ដោយ mass spectrometry ហើយបង្ហាញថា phosphorylation នៃ peptides RGA ពីរនៅក្នុងតំបន់ PolyS និង PolyS/T បង្កើនសកម្មភាព RGA ដោយជំរុញការភ្ជាប់ H2A និងការភ្ជាប់ RGA ជាមួយនឹង promoters គោលដៅ។ ជាពិសេស ផូស្វ័រឡាស្យុងមិនបានប៉ះពាល់ដល់អន្តរកម្ម RGA-TF ឬស្ថេរភាព RGA ទេ។ ការសិក្សារបស់យើងបង្ហាញពីយន្តការម៉ូលេគុលមួយដែលផូស្វ័រឡាស្យុងបង្កឱ្យមានសកម្មភាព DELLA។
ការវិភាគម៉ាសស្ពិចត្រូម៉ែត្ររបស់យើងបានបង្ហាញថា ទាំង Pep1 និង Pep2 ត្រូវបានផូស្វ័រខ្ពស់នៅក្នុង RGA នៅក្នុងផ្ទៃខាងក្រោយ Ga1 ដែលខ្វះ GA។ បន្ថែមពីលើការសិក្សានេះ ការសិក្សាអំពីផូស្វ័រប្រូតេអូមិចក៏បានបង្ហាញពីផូស្វ័រ Pep1 នៅក្នុង RGA ទោះបីជាតួនាទីរបស់វាមិនទាន់ត្រូវបានសិក្សានៅឡើយទេ53,54,55។ ផ្ទុយទៅវិញ ផូស្វ័រ Pep2 មិនត្រូវបានគេពិពណ៌នាពីមុនមកទេ ព្រោះ peptide នេះអាចត្រូវបានរកឃើញដោយប្រើតែ transgene RGAGKG ប៉ុណ្ណោះ។ ទោះបីជាការផ្លាស់ប្តូរ m1A ដែលលុបបំបាត់ផូស្វ័រ Pep1 បានកាត់បន្ថយសកម្មភាព RGA បន្តិចបន្តួចនៅក្នុងរុក្ខជាតិក៏ដោយ វាមានឥទ្ធិពលបន្ថែមនៅពេលផ្សំជាមួយ m2A ក្នុងការកាត់បន្ថយសកម្មភាព RGA (រូបភាពបន្ថែមទី 6)។ អ្វីដែលសំខាន់នោះ ផូស្វ័រ Pep1 ត្រូវបានកាត់បន្ថយយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងការផ្លាស់ប្តូរ sly1 ដែលបង្កើន GA បើប្រៀបធៀបទៅនឹង ga1 ដែលបង្ហាញថា GA ជំរុញការចុះខ្សោយ RGA ដែលកាត់បន្ថយសកម្មភាពរបស់វា។ យន្តការដែល GA ទប់ស្កាត់ផូស្វ័រ RGA តម្រូវឱ្យមានការស៊ើបអង្កេតបន្ថែម។ លទ្ធភាពមួយគឺថា នេះត្រូវបានសម្រេចតាមរយៈការគ្រប់គ្រងនៃ kinase ប្រូតេអ៊ីនដែលមិនស្គាល់អត្តសញ្ញាណ។ ទោះបីជាការសិក្សាបានបង្ហាញថាការបញ្ចេញមតិនៃប្រូតេអ៊ីន kinase CK1 EL1 ត្រូវបានធ្វើឱ្យចុះខ្សោយដោយ GA នៅក្នុងស្រូវ41ក៏ដោយ លទ្ធផលរបស់យើងបង្ហាញថាការផ្លាស់ប្តូរលំដាប់ខ្ពស់នៃ homologue Arabidopsis EL1 (AEL1-4) មិនកាត់បន្ថយ phosphorylation RGA ទេ។ ស្របតាមលទ្ធផលរបស់យើង ការសិក្សា phosphoproteomic ថ្មីៗនេះដោយប្រើខ្សែ Arabidopsis AEL overexpressing និង ael triple mutant មិនបានកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រូតេអ៊ីន DELLA ណាមួយជាស្រទាប់ខាងក្រោមនៃ kinase ទាំងនេះ56។ នៅពេលដែលយើងរៀបចំសាត្រាស្លឹករឹត វាត្រូវបានរាយការណ៍ថា GSK3 ដែលជាហ្សែនដែលអ៊ិនកូដ kinase ដូច GSK3/SHAGGY នៅក្នុងស្រូវសាលី (Triticum aestivum) អាច phosphorylation DELLA (Rht-B1b)57 ទោះបីជា phosphorylation នៃ Rht-B1b ដោយ GSK3 មិនទាន់ត្រូវបានបញ្ជាក់នៅក្នុងរុក្ខជាតិក៏ដោយ។ ប្រតិកម្មអង់ស៊ីមនៅក្នុងវីត្រូនៅក្នុងវត្តមាននៃ GSK3 បន្តដោយការវិភាគម៉ាសស្ពិចត្រូម៉ែត្រីបានបង្ហាញពីកន្លែងផូស្វ័រចំនួនបីដែលមានទីតាំងនៅចន្លោះដែន DELLA និង GRAS នៃ Rht-B1b (រូបភាពបន្ថែមទី 3)។ ការជំនួសសេរីនទៅជាអាឡានីននៅកន្លែងផូស្វ័រទាំងបីបានបណ្តាលឱ្យសកម្មភាព Rht-B1b ថយចុះនៅក្នុងស្រូវសាលីប្តូរហ្សែន ស្របនឹងការរកឃើញរបស់យើងថាការជំនួសអាឡានីននៅក្នុង Pep2 RGA បានបន្ថយសកម្មភាព RGA។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការវិភាគការរិចរិលប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងវីត្រូបានបង្ហាញបន្ថែមទៀតថា ការផូស្វ័រក៏អាចធ្វើឱ្យ Rht-B1b57 មានស្ថេរភាពផងដែរ។ នេះផ្ទុយពីលទ្ធផលរបស់យើងដែលបង្ហាញថាការជំនួសអាឡានីននៅក្នុង Pep2 RGA មិនផ្លាស់ប្តូរស្ថេរភាពរបស់វានៅក្នុងរុក្ខជាតិទេ។ GSK3 នៅក្នុងស្រូវសាលីគឺជាអ័រថូឡូកនៃប្រូតេអ៊ីនមិនងាយប្រតិកម្មនឹង brassinosteroid 2 (BIN2) នៅក្នុង Arabidopsis 57។ BIN2 គឺជានិយតករអវិជ្ជមាននៃការបញ្ជូនសញ្ញា BR ហើយ BR ធ្វើឱ្យផ្លូវបញ្ជូនសញ្ញារបស់វាសកម្មដោយបណ្តាលឱ្យមានការរិចរិល BIN2 58។ យើងបានបង្ហាញថាការព្យាបាលដោយ BR មិនកាត់បន្ថយស្ថេរភាព RGA 59 ឬកម្រិតផូស្វ័រនៅក្នុង Arabidopsis (រូបភាពបន្ថែម 2) ដែលបង្ហាញថា RGA ទំនងជាមិនត្រូវបានផូស្វ័រដោយ BIN2 ទេ។
ទិន្នន័យបរិមាណទាំងអស់ត្រូវបានវិភាគតាមស្ថិតិដោយប្រើ Excel ហើយភាពខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើតេស្ត t របស់សិស្ស។ មិនមានវិធីសាស្ត្រស្ថិតិណាមួយត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់ទំហំគំរូជាមុនទេ។ មិនមានទិន្នន័យណាមួយត្រូវបានដកចេញពីការវិភាគទេ។ ការពិសោធន៍មិនត្រូវបានចៃដន្យទេ។ ហើយអ្នកស្រាវជ្រាវបានដឹងអំពីការបែងចែកក្នុងអំឡុងពេលពិសោធន៍ និងការវាយតម្លៃលទ្ធផល។ ទំហំគំរូត្រូវបានផ្តល់ជូននៅក្នុងរឿងព្រេងនិទានរូបភាព និងនៅក្នុងឯកសារទិន្នន័យឆៅ។

 

ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ១៥ ខែមេសា ឆ្នាំ ២០២៥