អត្រាមរណភាព និងជាតិពុលនៃការរៀបចំស៊ីពែរមេទ្រីនសម្រាប់ពាណិជ្ជកម្មចំពោះកូនកណ្ដុរតូចៗដែលរស់នៅក្នុងទឹក

ការសិក្សានេះបានវាយតម្លៃពីភាពស្លាប់ ភាពអនុភាពស្លាប់ និងភាពពុលនៃផលិតផលពាណិជ្ជកម្មស៊ីពែរមេទ្រីនរូបមន្តសម្រាប់កូនកណ្ដុរអានូរ៉ាន។ នៅក្នុងការធ្វើតេស្តស្រួចស្រាវ កំហាប់ 100–800 μg/L ត្រូវបានធ្វើតេស្តរយៈពេល 96 ម៉ោង។ នៅក្នុងការធ្វើតេស្តរ៉ាំរ៉ៃ កំហាប់ស៊ីពែរមេទ្រីនដែលកើតឡើងដោយធម្មជាតិ (1, 3, 6, និង 20 μg/L) ត្រូវបានធ្វើតេស្តសម្រាប់អត្រាមរណភាព បន្ទាប់មកដោយការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ុស និងភាពមិនប្រក្រតីនៃស្នូលកោសិកាឈាមក្រហមរយៈពេល 7 ថ្ងៃ។ LC50 នៃរូបមន្តស៊ីពែរមេទ្រីនពាណិជ្ជកម្មចំពោះកូនកណ្ដុរគឺ 273.41 μg L−1។ នៅក្នុងការធ្វើតេស្តរ៉ាំរ៉ៃ កំហាប់ខ្ពស់បំផុត (20 μg L−1) បណ្តាលឱ្យមានអត្រាមរណភាពច្រើនជាង 50% ព្រោះវាបានសម្លាប់កូនកណ្ដុរពាក់កណ្តាលដែលបានធ្វើតេស្ត។ ការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ុសបានបង្ហាញលទ្ធផលគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៅ 6 និង 20 μg L−1 ហើយភាពមិនប្រក្រតីនៃស្នូលជាច្រើនត្រូវបានរកឃើញ ដែលបង្ហាញថារូបមន្តស៊ីពែរមេទ្រីនពាណិជ្ជកម្មមានសក្តានុពលពុលហ្សែនប្រឆាំងនឹង P. gracilis។ ស៊ីពែរមេទ្រីនគឺជាហានិភ័យខ្ពស់សម្រាប់ប្រភេទសត្វនេះ ដែលបង្ហាញថាវាអាចបង្កបញ្ហាច្រើន និងប៉ះពាល់ដល់ឌីណាមិកនៃប្រព័ន្ធអេកូឡូស៊ីនេះក្នុងរយៈពេលខ្លី និងរយៈពេលវែង។ ដូច្នេះ អាចសន្និដ្ឋានបានថា រូបមន្តស៊ីពើមេទ្រីនសម្រាប់ពាណិជ្ជកម្មមានឥទ្ធិពលពុលលើ P. gracilis។
ដោយសារតែការពង្រីកជាបន្តបន្ទាប់នៃសកម្មភាពកសិកម្ម និងការអនុវត្តយ៉ាងសកម្មនៃការគ្រប់គ្រងសត្វល្អិតវិធានការណ៍ សត្វក្នុងទឹកតែងតែប៉ះពាល់នឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត1,2។ ការបំពុលធនធានទឹកនៅជិតវាលស្រែកសិកម្មអាចប៉ះពាល់ដល់ការអភិវឌ្ឍ និងការរស់រានមានជីវិតរបស់សារពាង្គកាយដែលមិនមែនជាគោលដៅដូចជាសត្វអំពិល។
សត្វអំពិលកំពុងមានសារៈសំខាន់កាន់តែខ្លាំងឡើងនៅក្នុងការវាយតម្លៃម៉ាទ្រីសបរិស្ថាន។ សត្វអំពិលត្រូវបានចាត់ទុកថាជាសូចនាករជីវសាស្រ្តដ៏ល្អនៃការបំពុលបរិស្ថានដោយសារតែលក្ខណៈតែមួយគត់របស់វាដូចជាវដ្តជីវិតស្មុគស្មាញ អត្រាកំណើនដង្កូវយ៉ាងឆាប់រហ័ស ស្ថានភាពត្រូពិច ស្បែកដែលអាចជ្រាបចូលបាន10,11 ការពឹងផ្អែកលើទឹកសម្រាប់ការបន្តពូជ12 និងស៊ុតដែលមិនបានការពារ11,13,14។ កង្កែបទឹកតូច (Physalaemus gracilis) ដែលត្រូវបានគេស្គាល់ជាទូទៅថាជាកង្កែបយំ ត្រូវបានបង្ហាញថាជាប្រភេទសូចនាករជីវសាស្រ្តនៃការបំពុលថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត4,5,6,7,15។ ប្រភេទសត្វនេះត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងទឹកស្ងៀម តំបន់ការពារ ឬតំបន់ដែលមានជម្រកអថេរនៅក្នុងប្រទេសអាហ្សង់ទីន អ៊ុយរូហ្គាយ ប៉ារ៉ាហ្គាយ និងប្រេស៊ីល1617 ហើយត្រូវបានចាត់ទុកថាមានស្ថេរភាពដោយចំណាត់ថ្នាក់ IUCN ដោយសារតែការចែកចាយយ៉ាងទូលំទូលាយ និងការអត់ធ្មត់នៃជម្រកផ្សេងៗគ្នា18។
ផលប៉ះពាល់មិនបណ្តាលឲ្យស្លាប់ត្រូវបានរាយការណ៍នៅក្នុងសត្វអំភ្លីប៊ីបន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់នឹងស៊ីពើមេទ្រីន រួមទាំងការផ្លាស់ប្តូរអាកប្បកិរិយា រូបរាង និងជីវគីមីនៅក្នុងកូនអណ្តើក23,24,25 ការផ្លាស់ប្តូរអត្រាមរណភាព និងពេលវេលាបំប្លែងរូបរាង ការផ្លាស់ប្តូរអង់ស៊ីម ការថយចុះភាពជោគជ័យនៃការញាស់24,25 សកម្មភាពហួសប្រមាណ26 ការរារាំងសកម្មភាពកូលីនអេស្តេរ៉ាស27 និងការផ្លាស់ប្តូរសមត្ថភាពហែលទឹក7,28។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការសិក្សាអំពីផលប៉ះពាល់ពុលហ្សែននៃស៊ីពើមេទ្រីននៅក្នុងសត្វអំភ្លីប៊ីមានកម្រិត។ ដូច្នេះ វាជាការសំខាន់ក្នុងការវាយតម្លៃភាពងាយរងគ្រោះនៃប្រភេទសត្វអានូរ៉ានចំពោះស៊ីពើមេទ្រីន។
ការបំពុលបរិស្ថានប៉ះពាល់ដល់ការលូតលាស់ និងការអភិវឌ្ឍធម្មតារបស់សត្វអំភ្លីប៊ី ប៉ុន្តែផលប៉ះពាល់ធ្ងន់ធ្ងរបំផុតគឺការខូចខាតហ្សែនចំពោះ DNA ដែលបណ្តាលមកពីការប៉ះពាល់នឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត13។ ការវិភាគរូបវិទ្យាកោសិកាឈាមគឺជាសូចនាករជីវសាស្ត្រដ៏សំខាន់មួយនៃការបំពុល និងជាតិពុលដែលអាចកើតមាននៃសារធាតុចំពោះប្រភេទសត្វព្រៃ29។ ការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ុសគឺជាវិធីសាស្រ្តមួយក្នុងចំណោមវិធីសាស្រ្តដែលប្រើជាទូទៅបំផុតសម្រាប់កំណត់ជាតិពុលហ្សែននៃសារធាតុគីមីនៅក្នុងបរិស្ថាន30។ វាគឺជាវិធីសាស្រ្តរហ័ស មានប្រសិទ្ធភាព និងមានតម្លៃថោក ដែលជាសូចនាករដ៏ល្អនៃការបំពុលគីមីនៃសារពាង្គកាយដូចជាសត្វអំភ្លីប៊ី31,32 និងអាចផ្តល់ព័ត៌មានអំពីការប៉ះពាល់នឹងសារធាតុបំពុលហ្សែន33។
គោលបំណងនៃការសិក្សានេះគឺដើម្បីវាយតម្លៃសក្តានុពលពុលនៃរូបមន្តស៊ីពើមេទ្រីនពាណិជ្ជកម្មចំពោះកូនកណ្ដុរតូចៗដែលរស់នៅក្នុងទឹក ដោយប្រើការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ុស និងការវាយតម្លៃហានិភ័យអេកូឡូស៊ី។
អត្រាមរណភាពសរុប (%) នៃកូនកណ្ដុរ P. gracilis ដែលបានប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ផ្សេងៗគ្នានៃ cypermethrin ពាណិជ្ជកម្មក្នុងអំឡុងពេលស្រួចស្រាវនៃការធ្វើតេស្ត។
អត្រាមរណភាពសរុប (%) នៃកូនកណ្ដុរ P. gracilis ដែលប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ផ្សេងៗគ្នានៃសារធាតុ cypermethrin ពាណិជ្ជកម្មអំឡុងពេលធ្វើតេស្តរ៉ាំរ៉ៃ។
អត្រាមរណភាពខ្ពស់ដែលសង្កេតឃើញគឺជាលទ្ធផលនៃផលប៉ះពាល់ពុលហ្សែនចំពោះសត្វអំភ្លីប៊ីដែលប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ផ្សេងៗគ្នានៃស៊ីពែរមេទ្រីន (6 និង 20 μg/L) ដូចដែលបានបង្ហាញដោយវត្តមាននៃមីក្រូនុយក្លេអ៊ីក (MN) និងភាពមិនប្រក្រតីនៃនុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុងកោសិកាឈាមក្រហម។ ការបង្កើត MN បង្ហាញពីកំហុសក្នុងដំណើរការបំបែកកោសិកា ហើយត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការភ្ជាប់មិនល្អនៃក្រូម៉ូសូមទៅនឹងមីក្រូទូប៊ុល ពិការភាពនៅក្នុងស្មុគស្មាញប្រូតេអ៊ីនដែលទទួលខុសត្រូវចំពោះការទទួលយក និងដឹកជញ្ជូនក្រូម៉ូសូម កំហុសក្នុងការបែងចែកក្រូម៉ូសូម និងកំហុសក្នុងការជួសជុលការខូចខាត DNA38,39 ហើយអាចទាក់ទងនឹងភាពតានតឹងអុកស៊ីតកម្មដែលបង្កឡើងដោយថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត40,41។ ភាពមិនប្រក្រតីផ្សេងទៀតត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅកំហាប់ទាំងអស់ដែលបានវាយតម្លៃ។ ការកើនឡើងនៃកំហាប់ស៊ីពែរមេទ្រីនបានបង្កើនភាពមិនប្រក្រតីនៃនុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុងកោសិកាឈាមក្រហម 5% និង 20% នៅកម្រិតទាបបំផុត (1 μg/L) និងខ្ពស់បំផុត (20 μg/L) រៀងៗខ្លួន។ ឧទាហរណ៍ ការផ្លាស់ប្តូរ DNA របស់ប្រភេទសត្វអាចមានផលវិបាកធ្ងន់ធ្ងរសម្រាប់ការរស់រានមានជីវិតទាំងរយៈពេលខ្លី និងរយៈពេលវែង ដែលបណ្តាលឱ្យមានការថយចុះចំនួនប្រជាជន ការផ្លាស់ប្តូរសម្បទាបន្តពូជ ការបង្កាត់ពូជក្នុងពូជ ការបាត់បង់ភាពចម្រុះហ្សែន និងអត្រាធ្វើចំណាកស្រុកដែលបានផ្លាស់ប្តូរ។ កត្តាទាំងអស់នេះអាចប៉ះពាល់ដល់ការរស់រានមានជីវិត និងការថែរក្សាប្រភេទសត្វ42,43។ ការបង្កើតភាពមិនប្រក្រតីនៃកោសិកាឈាមក្រហមអាចបង្ហាញពីការរារាំងនៃ cytokinesis ដែលបណ្តាលឱ្យមានការបែងចែកកោសិកាមិនប្រក្រតី (កោសិកាឈាមក្រហមដែលមានស្នូលពីរ)44,45; ស្នូលពហុស្រទាប់គឺជាផ្នែកដែលលេចចេញនៃភ្នាសនុយក្លេអ៊ែរដែលមានស្នូលច្រើន46 ខណៈពេលដែលភាពមិនប្រក្រតីនៃកោសិកាឈាមក្រហមផ្សេងទៀតអាចត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការពង្រីក DNA ដូចជាតម្រងនោមនុយក្លេអ៊ែរ/ដុំឈាមកក47។ វត្តមាននៃកោសិកាឈាមក្រហមដែលមិនមានស្នូលអាចបង្ហាញពីការដឹកជញ្ជូនអុកស៊ីសែនខ្សោយ ជាពិសេសនៅក្នុងទឹកដែលមានមេរោគ48,49។ Apoptosis បង្ហាញពីការស្លាប់កោសិកា50។
ការសិក្សាផ្សេងទៀតក៏បានបង្ហាញពីផលប៉ះពាល់ពុលហ្សែនរបស់ cypermethrin ផងដែរ។ Kabaña et al.51 បានបង្ហាញពីវត្តមាននៃការផ្លាស់ប្តូរមីក្រូនុយក្លេអ៊ីក និងនុយក្លេអ៊ែរដូចជាកោសិកាដែលមានស្នូលពីរ និងកោសិកា apoptosis នៅក្នុងកោសិកា Odontophrynus americanus បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ខ្ពស់នៃ cypermethrin (5000 និង 10,000 μg L−1) រយៈពេល 96 ម៉ោង។ apoptosis ដែលបង្កឡើងដោយ cypermethrin ក៏ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុង P. biligonigerus52 និង Rhinella arenarum53 ផងដែរ។ លទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញថា cypermethrin មានឥទ្ធិពលពុលហ្សែនលើសារពាង្គកាយក្នុងទឹកជាច្រើនប្រភេទ ហើយការវិភាគ MN និង ENA អាចជាសូចនាករនៃផលប៉ះពាល់មិនស្លាប់លើសត្វអំភ្លីប៊ី និងអាចអនុវត្តបានចំពោះប្រភេទសត្វដើមកំណើត និងចំនួនប្រជាជនព្រៃដែលប៉ះពាល់នឹងសារធាតុពុល12។
រូបមន្តពាណិជ្ជកម្មនៃ cypermethrin បង្កគ្រោះថ្នាក់បរិស្ថានខ្ពស់ (ទាំងស្រួចស្រាវ និងរ៉ាំរ៉ៃ) ដោយទីស្នាក់ការកណ្តាលលើសពីកម្រិតរបស់ទីភ្នាក់ងារការពារបរិស្ថានសហរដ្ឋអាមេរិក (EPA)54 ដែលអាចប៉ះពាល់អវិជ្ជមានដល់ប្រភេទសត្វប្រសិនបើមានវត្តមាននៅក្នុងបរិស្ថាន។ នៅក្នុងការវាយតម្លៃហានិភ័យរ៉ាំរ៉ៃ NOEC សម្រាប់អត្រាមរណភាពគឺ 3 μg L−1 ដែលបញ្ជាក់ថាកំហាប់ដែលរកឃើញនៅក្នុងទឹកអាចបង្កហានិភ័យដល់ប្រភេទសត្វ55។ NOEC ដ៏សាហាវសម្រាប់ដង្កូវ R. arenarum ដែលប៉ះពាល់នឹងល្បាយនៃ endosulfan និង cypermethrin គឺ 500 μg L−1 បន្ទាប់ពី 168 ម៉ោង។ តម្លៃនេះបានថយចុះមកត្រឹម 0.0005 μg L−1 បន្ទាប់ពី 336 ម៉ោង។ អ្នកនិពន្ធបង្ហាញថា ការប៉ះពាល់កាន់តែយូរ កំហាប់ដែលបង្កគ្រោះថ្នាក់ដល់ប្រភេទសត្វកាន់តែទាប។ វាក៏សំខាន់ផងដែរក្នុងការបញ្ជាក់ថាតម្លៃ NOEC គឺខ្ពស់ជាងតម្លៃរបស់ P. gracilis នៅពេលប៉ះពាល់ដូចគ្នា ដែលបង្ហាញថាការឆ្លើយតបរបស់ប្រភេទសត្វចំពោះ cypermethrin គឺជាក់លាក់ចំពោះប្រភេទសត្វ។ លើសពីនេះទៀត ទាក់ទងនឹងអត្រាមរណភាព តម្លៃ CHQ នៃ P. gracilis បន្ទាប់ពីប៉ះពាល់នឹង cypermethrin បានឈានដល់ 64.67 ដែលខ្ពស់ជាងតម្លៃយោងដែលកំណត់ដោយទីភ្នាក់ងារការពារបរិស្ថានសហរដ្ឋអាមេរិក54 ហើយតម្លៃ CHQ នៃដង្កូវ R. arenarum ក៏ខ្ពស់ជាងតម្លៃនេះដែរ (CHQ > 388.00 បន្ទាប់ពី 336 ម៉ោង) ដែលបង្ហាញថាថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតដែលបានសិក្សាបង្កហានិភ័យខ្ពស់ដល់ប្រភេទសត្វអំពិលអំពែកជាច្រើន។ ដោយពិចារណាថា P. gracilis ត្រូវការពេលប្រហែល 30 ថ្ងៃដើម្បីបញ្ចប់ការផ្លាស់ប្តូររូបរាង56 វាអាចសន្និដ្ឋានបានថាកំហាប់ cypermethrin ដែលបានសិក្សាអាចរួមចំណែកដល់ការថយចុះចំនួនប្រជាជនដោយការពារបុគ្គលដែលឆ្លងមេរោគពីការចូលទៅក្នុងដំណាក់កាលពេញវ័យ ឬដំណាក់កាលបន្តពូជនៅវ័យក្មេង។
នៅក្នុងការវាយតម្លៃហានិភ័យដែលបានគណនានៃមីក្រូនុយក្លេអ៊ីក និងភាពមិនប្រក្រតីនៃស្នូលក្រហមផ្សេងទៀត តម្លៃ CHQ មានចាប់ពី 14.92 ដល់ 97.00 ដែលបង្ហាញថា ស៊ីពែរមេទ្រីនមានហានិភ័យពុលហ្សែនចំពោះ P. gracilis សូម្បីតែនៅក្នុងជម្រកធម្មជាតិរបស់វាក៏ដោយ។ ដោយគិតគូរពីអត្រាមរណភាព កំហាប់អតិបរមានៃសមាសធាតុ xenobiotic ដែលអាចទ្រាំទ្របានចំពោះ P. gracilis គឺ 4.24 μg L−1។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ កំហាប់ទាបដល់ 1 μg/L ក៏បានបង្ហាញពីផលប៉ះពាល់ពុលហ្សែនផងដែរ។ ការពិតនេះអាចនាំឱ្យមានការកើនឡើងនៃចំនួនបុគ្គលមិនប្រក្រតី 57 និងប៉ះពាល់ដល់ការអភិវឌ្ឍ និងការបន្តពូជនៃប្រភេទសត្វនៅក្នុងជម្រករបស់វា ដែលនាំឱ្យមានការថយចុះនៃចំនួនប្រជាជនអំប៊ីប៊ីក។
រូបមន្តពាណិជ្ជកម្មនៃថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត cypermethrin បានបង្ហាញពីជាតិពុលស្រួចស្រាវ និងរ៉ាំរ៉ៃខ្ពស់ចំពោះ P. gracilis។ អត្រាមរណភាពខ្ពស់ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញ ដែលទំនងជាដោយសារតែផលប៉ះពាល់ពុល ដូចដែលបានបង្ហាញដោយវត្តមាននៃមីក្រូនុយក្លេអ៊ីក និងភាពមិនប្រក្រតីនៃស្នូលកោសិកាឈាមក្រហម ជាពិសេសស្នូលរាងជាចង្អូរ ស្នូលរាងជាដុំៗ និងស្នូលរាងពងក្រពើ។ លើសពីនេះ ប្រភេទសត្វដែលបានសិក្សាបានបង្ហាញពីហានិភ័យបរិស្ថានកើនឡើង ទាំងស្រួចស្រាវ និងរ៉ាំរ៉ៃ។ ទិន្នន័យទាំងនេះ រួមផ្សំជាមួយនឹងការសិក្សាពីមុនដោយក្រុមស្រាវជ្រាវរបស់យើង បានបង្ហាញថា សូម្បីតែរូបមន្តពាណិជ្ជកម្មផ្សេងៗគ្នានៃ cypermethrin នៅតែបណ្តាលឱ្យមានសកម្មភាព acetylcholinesterase (AChE) និង butyrylcholinesterase (BChE) ថយចុះ និងភាពតានតឹងអុកស៊ីតកម្ម 58 ហើយបានបណ្តាលឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាពហែលទឹក និងភាពមិនប្រក្រតីនៃមាត់ 59 នៅក្នុង P. gracilis ដែលបង្ហាញថារូបមន្តពាណិជ្ជកម្មនៃ cypermethrin មានជាតិពុលធ្ងន់ធ្ងរ និងស្រាលដល់ប្រភេទសត្វនេះ។ Hartmann et al. 60 បានរកឃើញថា រូបមន្តពាណិជ្ជកម្មនៃ cypermethrin គឺជាជាតិពុលបំផុតចំពោះ P. gracilis និងប្រភេទសត្វមួយផ្សេងទៀតនៃពពួកដូចគ្នា (P. cuvieri) បើប្រៀបធៀបទៅនឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតចំនួនប្រាំបួនផ្សេងទៀត។ នេះបង្ហាញថា កំហាប់ស៊ីពែរមេទ្រីនដែលត្រូវបានអនុម័តដោយស្របច្បាប់សម្រាប់ការការពារបរិស្ថានអាចបណ្តាលឱ្យមានអត្រាមរណភាពខ្ពស់ និងការថយចុះចំនួនប្រជាជនរយៈពេលវែង។
ការសិក្សាបន្ថែមទៀតគឺត្រូវការជាចាំបាច់ដើម្បីវាយតម្លៃពីជាតិពុលនៃថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតចំពោះសត្វអំពិលអំពែក ព្រោះកំហាប់ដែលមាននៅក្នុងបរិស្ថានអាចបណ្តាលឱ្យមានអត្រាមរណភាពខ្ពស់ និងបង្កហានិភ័យដល់ P. gracilis។ ការស្រាវជ្រាវលើប្រភេទសត្វអំពិលអំពែកគួរតែត្រូវបានលើកទឹកចិត្ត ព្រោះទិន្នន័យលើសារពាង្គកាយទាំងនេះមានកម្រិត ជាពិសេសលើប្រភេទសត្វប្រេស៊ីល។
ការធ្វើតេស្តពុលរ៉ាំរ៉ៃមានរយៈពេល 168 ម៉ោង (7 ថ្ងៃ) ក្រោមលក្ខខណ្ឌឋិតិវន្ត ហើយកំហាប់មិនបណ្តាលឲ្យស្លាប់គឺ៖ 1, 3, 6 និង 20 μg ai L−1។ នៅក្នុងការពិសោធន៍ទាំងពីរ កូនកណ្ដុរចំនួន 10 ក្បាលក្នុងមួយក្រុមព្យាបាលត្រូវបានវាយតម្លៃជាមួយនឹងការចម្លងចំនួនប្រាំមួយ សម្រាប់កូនកណ្ដុរសរុបចំនួន 60 ក្បាលក្នុងមួយកំហាប់។ ទន្ទឹមនឹងនេះ ការព្យាបាលដោយទឹកតែមួយមុខបានបម្រើជាការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន។ ការរៀបចំពិសោធន៍នីមួយៗមានចានកែវមាប់មគដែលមានសមត្ថភាព 500 មីលីលីត្រ និងដង់ស៊ីតេកូនកណ្ដុរ 1 ក្បាលក្នុង 50 មីលីលីត្រនៃដំណោះស្រាយ។ ដបត្រូវបានគ្របដោយខ្សែភាពយន្តប៉ូលីអេទីឡែនដើម្បីការពារការហួត ហើយត្រូវបានបញ្ចេញខ្យល់ជាបន្តបន្ទាប់។
ទឹកត្រូវបានវិភាគតាមបែបគីមី ដើម្បីកំណត់កំហាប់ថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតនៅ 0, 96 និង 168 ម៉ោង។ យោងតាម ​​Sabin et al. 68 និង Martins et al. 69 ការវិភាគត្រូវបានអនុវត្តនៅមន្ទីរពិសោធន៍វិភាគថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត (LARP) នៃសាកលវិទ្យាល័យសហព័ន្ធ Santa Maria ដោយប្រើឧស្ម័នក្រូម៉ាតូក្រាហ្វី ភ្ជាប់ទៅនឹងវិសាលគមម៉ាស់ត្រីគុណបួនប៉ូល (ម៉ូដែល Varian 1200, Palo Alto, California, សហរដ្ឋអាមេរិក)។ ការកំណត់បរិមាណថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតក្នុងទឹកត្រូវបានបង្ហាញជាសម្ភារៈបន្ថែម (តារាង SM1)។
ចំពោះការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ុស (MNT) និងការធ្វើតេស្តភាពមិនប្រក្រតីនៃនុយក្លេអ៊ែរកោសិកាក្រហម (RNA) កូនកណ្ដុរចំនួន 15 ក្បាលពីក្រុមព្យាបាលនីមួយៗត្រូវបានវិភាគ។ កូនកណ្ដុរត្រូវបានចាក់ថ្នាំសណ្ដំដោយលីដូកេន 5% (50 មីលីក្រាម g-170) ហើយសំណាកឈាមត្រូវបានប្រមូលដោយការចោះបេះដូងដោយប្រើសឺរាំង heparin ដែលប្រើចោលបាន។ ស្នាមប្រឡាក់ឈាមត្រូវបានរៀបចំនៅលើស្លាយមីក្រូទស្សន៍មាប់មគ សម្ងួតដោយខ្យល់ ជួសជុលជាមួយមេតាណុល 100% (4 °C) រយៈពេល 2 នាទី ហើយបន្ទាប់មកប្រឡាក់ជាមួយដំណោះស្រាយ Giemsa 10% រយៈពេល 15 នាទីក្នុងទីងងឹត។ នៅចុងបញ្ចប់នៃដំណើរការ ស្លាយត្រូវបានលាងសម្អាតជាមួយទឹកចម្រោះដើម្បីយកស្នាមប្រឡាក់លើសចេញ ហើយសម្ងួតនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។
យ៉ាងហោចណាស់កោសិកាឈាមក្រហមចំនួន 1000 ពីកូនកណ្ដុរនីមួយៗត្រូវបានវិភាគដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍ 100× ជាមួយនឹងគោលបំណង 71 ដើម្បីកំណត់វត្តមានរបស់ MN និង ENA។ កោសិកាឈាមក្រហមសរុបចំនួន 75,796 ពីកូនកណ្ដុរត្រូវបានវាយតម្លៃដោយពិចារណាលើកំហាប់ cypermethrin និងក្រុមត្រួតពិនិត្យ។ ភាពពុលហ្សែនត្រូវបានវិភាគតាមវិធីសាស្ត្ររបស់ Carrasco et al. និង Fenech et al.38,72 ដោយកំណត់ភាពញឹកញាប់នៃដំបៅនុយក្លេអ៊ែរដូចខាងក្រោម៖ (1) កោសិកា annucleate៖ កោសិកាដែលគ្មានស្នូល; (2) កោសិកា apoptosis៖ ការបំបែកនុយក្លេអ៊ែរ ការស្លាប់កោសិកាតាមកម្មវិធី; (3) កោសិកា binucleate៖ កោសិកាដែលមានស្នូលពីរ; (4) ពន្លកនុយក្លេអ៊ែរ ឬកោសិកា bleb៖ កោសិកាដែលមានស្នូលដែលមានផ្នែកតូចៗនៃភ្នាសនុយក្លេអ៊ែរ ដុំពកដែលមានទំហំស្រដៀងគ្នាទៅនឹងមីក្រូនុយក្លេអ៊ែរ; (5) កោសិកា karyolyzed៖ កោសិកាដែលមានតែគ្រោងនៃស្នូលដោយគ្មានសម្ភារៈខាងក្នុង; (6) កោសិកាដែលមានស្នាមរន្ធ៖ កោសិកាដែលមានស្នូលដែលមានស្នាមប្រេះ ឬស្នាមរន្ធជាក់ស្តែងនៅក្នុងរូបរាងរបស់វា ដែលត្រូវបានគេហៅថាស្នូលរាងតម្រងនោម; (7) កោសិកាដែលមានដុំពក៖ កោសិកាដែលមានផ្នែកលេចចេញនៃស្នូលធំជាងវេស៊ីខលដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ; និង (8) មីក្រូកោសិកា៖ កោសិកាដែលមានស្នូលរួមតូច និងស៊ីតូប្លាស្មដែលថយចុះ។ ការផ្លាស់ប្តូរត្រូវបានប្រៀបធៀបជាមួយនឹងលទ្ធផលត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមាន។
លទ្ធផលតេស្តពុលស្រួចស្រាវ (LC50) ត្រូវបានវិភាគដោយប្រើកម្មវិធី GBasic និងវិធីសាស្ត្រ TSK-Trimmed Spearman-Karber74។ ទិន្នន័យតេស្តរ៉ាំរ៉ៃត្រូវបានសាកល្បងជាមុនសម្រាប់ភាពធម្មតានៃកំហុស (Shapiro-Wilks) និងភាពដូចគ្នានៃភាពខុសគ្នា (Bartlett)។ លទ្ធផលត្រូវបានវិភាគដោយប្រើការវិភាគភាពខុសគ្នាតែមួយផ្លូវ (ANOVA)។ ការធ្វើតេស្តរបស់ Tukey ត្រូវបានប្រើដើម្បីប្រៀបធៀបទិន្នន័យក្នុងចំណោមពួកគេ ហើយការធ្វើតេស្តរបស់ Dunnett ត្រូវបានប្រើដើម្បីប្រៀបធៀបទិន្នន័យរវាងក្រុមព្យាបាល និងក្រុមត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមាន។
ទិន្នន័យ LOEC និង NOEC ត្រូវបានវិភាគដោយប្រើតេស្តរបស់ Dunnett។ ការធ្វើតេស្តស្ថិតិត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើកម្មវិធី Statistica 8.0 (StatSoft) ជាមួយនឹងកម្រិតសារៈសំខាន់ 95% (p < 0.05)។