ការសិក្សានេះបានវាយតម្លៃភាពស្លាប់ ភាពទន់ខ្សោយ និងការពុលនៃពាណិជ្ជកម្មcypermethrinរូបមន្តសម្រាប់ tadpoles anuran ។ នៅក្នុងការធ្វើតេស្តស្រួចស្រាវការប្រមូលផ្តុំនៃ 100-800 μg / L ត្រូវបានធ្វើតេស្តសម្រាប់រយៈពេល 96 ម៉ោង។ នៅក្នុងការធ្វើតេស្តរ៉ាំរ៉ៃ កំហាប់ cypermethrin ដែលកើតឡើងដោយធម្មជាតិ (1, 3, 6, និង 20 μg/L) ត្រូវបានធ្វើតេស្តសម្រាប់ការស្លាប់ បន្ទាប់មកដោយការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ែរ និងភាពមិនប្រក្រតីនៃកោសិកាឈាមក្រហមរយៈពេល 7 ថ្ងៃ។ LC50 នៃការបង្កើត cypermethrin ពាណិជ្ជកម្មដល់ tadpoles គឺ 273.41 μg L−1 ។ នៅក្នុងការធ្វើតេស្តរ៉ាំរ៉ៃ កំហាប់ខ្ពស់បំផុត (20 μg L−1) បណ្តាលឱ្យមានការស្លាប់ច្រើនជាង 50% ព្រោះវាសម្លាប់ពាក់កណ្តាលនៃ tadpoles ដែលបានធ្វើតេស្ត។ ការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ែរបានបង្ហាញពីលទ្ធផលគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៅ 6 និង 20 μg L−1 ហើយភាពមិនប្រក្រតីនៃនុយក្លេអ៊ែរជាច្រើនត្រូវបានគេរកឃើញដែលបង្ហាញថារូបមន្ត cypermethrin ពាណិជ្ជកម្មមានសក្តានុពល genotoxic ប្រឆាំងនឹង P. gracilis ។ Cypermethrin គឺជាហានិភ័យខ្ពស់សម្រាប់ប្រភេទសត្វនេះ ដែលបង្ហាញថាវាអាចបង្កបញ្ហាជាច្រើន និងប៉ះពាល់ដល់សក្ដានុពលនៃប្រព័ន្ធអេកូឡូស៊ីនេះក្នុងរយៈពេលខ្លី និងវែង។ ដូច្នេះវាអាចត្រូវបានសន្និដ្ឋានថាទម្រង់ cypermethrin ពាណិជ្ជកម្មមានឥទ្ធិពលពុលលើ P. gracilis ។
ដោយសារតែការពង្រីកសកម្មភាពកសិកម្មជាបន្តបន្ទាប់ និងការអនុវត្តយ៉ាងយកចិត្តទុកដាក់ការគ្រប់គ្រងសត្វល្អិតវិធានការណ៍ សត្វក្នុងទឹកត្រូវប្រឈមមុខនឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតជាញឹកញាប់ ១,២. ការបំពុលនៃធនធានទឹកនៅជិតវាលកសិកម្មអាចប៉ះពាល់ដល់ការអភិវឌ្ឍន៍ និងការរស់រានមានជីវិតរបស់សារពាង្គកាយដែលមិនមែនជាគោលដៅ ដូចជាសត្វ amphibians ជាដើម។
Amphibians កាន់តែមានសារៈសំខាន់ក្នុងការវាយតម្លៃម៉ាទ្រីសបរិស្ថាន។ Anurans ត្រូវបានគេចាត់ទុកថាជាសូចនាករជីវសាស្រ្តដ៏ល្អនៃការបំពុលបរិស្ថាន ដោយសារលក្ខណៈពិសេសរបស់វាដូចជា វដ្តជីវិតដ៏ស្មុគស្មាញ អត្រាកំណើនដង្កូវយ៉ាងឆាប់រហ័ស ស្ថានភាព trophic ស្បែកដែលអាចជ្រាបចូលបាន 10,11 ការពឹងផ្អែកលើទឹកសម្រាប់ការបន្តពូជ12 និងស៊ុតដែលមិនបានការពារ 11,13,14។ កង្កែបទឹកតូច (Physalaemus gracilis) ដែលត្រូវបានគេស្គាល់ជាទូទៅថាជាកង្កែបយំ ត្រូវបានបង្ហាញថាជាប្រភេទជីវគីមីនៃការបំពុលថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត 4,5,6,7,15។ ប្រភេទសត្វនេះត្រូវបានគេរកឃើញនៅក្នុងដែនទឹក តំបន់ការពារ ឬតំបន់ដែលមានជម្រកប្រែប្រួលក្នុងប្រទេស អាហ្សង់ទីន អ៊ុយរូហ្គាយ ប៉ារ៉ាហ្គាយ និងប្រេស៊ីល ១៦១៧ ហើយត្រូវបានចាត់ទុកថាមានស្ថេរភាពដោយការចាត់ថ្នាក់របស់ IUCN ដោយសារតែការចែកចាយយ៉ាងទូលំទូលាយ និងការអត់ធ្មត់នៃជម្រកផ្សេងៗគ្នា 18 ។
ផលប៉ះពាល់នៃសារធាតុ Sublethal ត្រូវបានរាយការណ៍នៅក្នុងសត្វ amphibians បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់នឹង cypermethrin រួមទាំងការផ្លាស់ប្តូរអាកប្បកិរិយា morphological និង biochemical នៅក្នុង tadpoles23,24,25, ផ្លាស់ប្តូរការស្លាប់ និងពេលវេលា metamorphosis, ការផ្លាស់ប្តូរអង់ស៊ីម, ការថយចុះការញាស់ Success24,25, hyperactivity26, inhibition of 7,278 និងការផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាព cholinesterase ។ ទោះបីជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការសិក្សាអំពីឥទ្ធិពល genotoxic នៃ cypermethrin នៅក្នុង amphibians ត្រូវបានកំណត់។ ដូច្នេះវាមានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងការវាយតម្លៃភាពងាយរងគ្រោះនៃប្រភេទ anuran ទៅនឹង cypermethrin ។
ការបំពុលបរិស្ថានប៉ះពាល់ដល់ការលូតលាស់ធម្មតា និងការវិវឌ្ឍន៍របស់សត្វពាហនៈ ប៉ុន្តែផលប៉ះពាល់ធ្ងន់ធ្ងរបំផុតគឺការបំផ្លាញហ្សែនទៅ DNA ដែលបណ្តាលមកពីការប៉ះពាល់ថ្នាំសំលាប់សត្វល្អិត 13. ការវិភាគសរីរវិទ្យានៃកោសិកាឈាមគឺជាសូចនាករជីវសាស្រ្តដ៏សំខាន់នៃការបំពុល និងការពុលសក្តានុពលនៃសារធាតុចំពោះប្រភេទសត្វព្រៃ29. ការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេយូស គឺជាវិធីសាស្រ្តមួយដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់ជាទូទៅបំផុតសម្រាប់កំណត់ការពុលហ្សែននៃសារធាតុគីមីនៅក្នុងបរិស្ថាន30។ វាគឺជាវិធីសាស្រ្តរហ័ស មានប្រសិទ្ធភាព និងមានតំលៃថោក ដែលជាសូចនាករដ៏ល្អនៃការបំពុលគីមីនៃសារពាង្គកាយដូចជា amphibians31,32 និងអាចផ្តល់ព័ត៌មានស្តីពីការប៉ះពាល់ទៅនឹងសារធាតុពុល genotoxic33។
គោលបំណងនៃការសិក្សានេះគឺដើម្បីវាយតម្លៃសក្តានុពលពុលនៃរូបមន្ត cypermethrin ពាណិជ្ជកម្មចំពោះកូនកណ្ដុរក្នុងទឹកតូចៗ ដោយប្រើការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ែរ និងការវាយតម្លៃហានិភ័យអេកូឡូស៊ី។
អត្រាមរណៈសរុប (%) នៃកូនតាដប៉ូល P. gracilis ដែលប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ផ្សេងៗនៃ cypermethrin ពាណិជ្ជកម្ម អំឡុងពេលស្រួចស្រាវនៃការធ្វើតេស្ត។
អត្រាមរណៈសរុប (%) នៃកូនតាតប៉ូល P. gracilis ដែលប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ផ្សេងៗនៃ cypermethrin ពាណិជ្ជកម្មអំឡុងពេលធ្វើតេស្តរ៉ាំរ៉ៃ។
អត្រាមរណភាពខ្ពស់ដែលត្រូវបានសង្កេតឃើញគឺជាលទ្ធផលនៃឥទ្ធិពល genotoxic នៅក្នុង amphibians ដែលប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ផ្សេងគ្នានៃ cypermethrin (6 និង 20 μg/L) ដូចដែលបានបង្ហាញដោយវត្តមានរបស់ micronuclei (MN) និងភាពមិនប្រក្រតីនៃនុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុង erythrocytes ។ ការបង្កើត MN បង្ហាញពីកំហុសក្នុង mitosis និងត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការផ្សារភ្ជាប់មិនល្អនៃក្រូម៉ូសូមទៅនឹង microtubules ពិការភាពក្នុងស្មុគស្មាញប្រូតេអ៊ីនដែលទទួលខុសត្រូវចំពោះការស្រូបយក និងដឹកជញ្ជូនក្រូម៉ូសូម កំហុសក្នុងការបំបែកក្រូម៉ូសូម និងកំហុសក្នុងការជួសជុលការខូចខាត DNA38,39 និងអាចទាក់ទងនឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត ភាពតានតឹងអុកស៊ីតកម្ម 40.41 ។ ភាពមិនធម្មតាផ្សេងទៀតត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅគ្រប់ការប្រមូលផ្តុំដែលបានវាយតម្លៃ។ ការបង្កើនកំហាប់ cypermethrin បង្កើនភាពមិនប្រក្រតីនៃនុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុង erythrocytes ដោយ 5% និង 20% នៅកម្រិតទាបបំផុត (1 μg/L) និងខ្ពស់បំផុត (20 μg/L) រៀងគ្នា។ ជាឧទាហរណ៍ ការផ្លាស់ប្តូរ DNA នៃប្រភេទសត្វអាចមានផលវិបាកយ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរសម្រាប់ការរស់រានមានជីវិតរយៈពេលខ្លី និងរយៈពេលវែង ដែលបណ្តាលឱ្យមានការថយចុះចំនួនប្រជាជន ការផ្លាស់ប្តូរសម្បទាបន្តពូជ ការបង្កាត់ពូជ ការបាត់បង់ភាពចម្រុះនៃហ្សែន និងការផ្លាស់ប្តូរអត្រាការធ្វើចំណាកស្រុក។ កត្តាទាំងអស់នេះអាចប៉ះពាល់ដល់ការរស់រានមានជីវិត និងការថែទាំប្រភេទសត្វ42,43។ ការបង្កើតភាពមិនធម្មតានៃ erythroid អាចបង្ហាញពីការទប់ស្កាត់នៅក្នុង cytokinesis ដែលបណ្តាលឱ្យមានការបែងចែកកោសិកាមិនធម្មតា (binucleated erythrocytes) 44,45; multilobed nuclei គឺជាការលេចចេញនៃភ្នាសនុយក្លេអ៊ែរដែលមាន lobes46 ច្រើន ខណៈពេលដែលភាពមិនធម្មតានៃ erythroid ផ្សេងទៀតអាចត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការពង្រីក DNA ដូចជាតម្រងនោមនុយក្លេអ៊ែរ / blebs47 ។ វត្តមានរបស់ erythrocytes anucleated អាចបង្ហាញពីការថយចុះនៃការដឹកជញ្ជូនអុកស៊ីសែន ជាពិសេសនៅក្នុងទឹកកខ្វក់ 48,49 ។ Apoptosis បង្ហាញពីការស្លាប់កោសិកា 50.
ការសិក្សាផ្សេងទៀតក៏បានបង្ហាញពីឥទ្ធិពល genotoxic នៃ cypermethrin ផងដែរ។ Kabaña et al.51 បានបង្ហាញពីវត្តមានរបស់ micronuclei និងការផ្លាស់ប្តូរនុយក្លេអ៊ែរ ដូចជាកោសិកា binucleated និងកោសិកា apoptotic នៅក្នុងកោសិកា Odontophrynus americanus បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់ទៅនឹងកំហាប់ខ្ពស់នៃ cypermethrin (5000 និង 10,000 μg L−1) រយៈពេល 96 ម៉ោង។ Apoptosis ដែលបណ្ដាលមកពី Cypermethrin ក៏ត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុង P. biligonigerus52 និង Rhinella arenarum53 ផងដែរ។ លទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញថា cypermethrin មានឥទ្ធិពល genotoxic លើពពួកសារពាង្គកាយក្នុងទឹក ហើយការវិភាគ MN និង ENA អាចជាសូចនាករនៃផលប៉ះពាល់ sublethal លើ amphibians ហើយអាចអនុវត្តបានចំពោះប្រភេទសត្វដើម និងប្រជាជនព្រៃដែលប្រឈមនឹងសារធាតុពុល12។
ទម្រង់ពាណិជ្ជកម្មនៃ cypermethrin បង្កគ្រោះថ្នាក់ដល់បរិស្ថានខ្ពស់ (ទាំងស្រួចស្រាវ និងរ៉ាំរ៉ៃ) ជាមួយនឹង HQs លើសពីទីភ្នាក់ងារការពារបរិស្ថានសហរដ្ឋអាមេរិក (EPA) កម្រិត 54 ដែលអាចប៉ះពាល់យ៉ាងធ្ងន់ធ្ងរដល់ប្រភេទសត្វប្រសិនបើមានវត្តមាននៅក្នុងបរិស្ថាន។ នៅក្នុងការវាយតម្លៃហានិភ័យរ៉ាំរ៉ៃ NOEC សម្រាប់ការស្លាប់គឺ 3 μg L−1 ដោយបញ្ជាក់ថាការប្រមូលផ្តុំដែលមាននៅក្នុងទឹកអាចបង្កហានិភ័យដល់ប្រភេទសត្វ55។ NOEC ដ៍សាហាវសម្រាប់ដង្កូវ R. arenarum ដែលប៉ះពាល់នឹងល្បាយនៃ endosulfan និង cypermethrin គឺ 500 μg L−1 បន្ទាប់ពី 168 ម៉ោង; តម្លៃនេះបានថយចុះដល់ 0.0005 μg L−1 បន្ទាប់ពី 336 ម៉ោង។ អ្នកនិពន្ធបង្ហាញថា ការប៉ះពាល់កាន់តែយូរ ការប្រមូលផ្តុំដែលបង្កគ្រោះថ្នាក់ដល់ប្រភេទសត្វកាន់តែទាប។ វាក៏សំខាន់ផងដែរក្នុងការគូសបញ្ជាក់ថាតម្លៃ NOEC គឺខ្ពស់ជាង P. gracilis ក្នុងពេលតែមួយ ដែលបង្ហាញថាប្រភេទសត្វឆ្លើយតបទៅនឹង cypermethrin គឺជាប្រភេទសត្វជាក់លាក់។ លើសពីនេះ នៅក្នុងលក្ខខណ្ឌនៃការស្លាប់ តម្លៃ CHQ នៃ P. gracilis បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់នឹង cypermethrin ឈានដល់ 64.67 ដែលខ្ពស់ជាងតម្លៃយោងដែលកំណត់ដោយទីភ្នាក់ងារការពារបរិស្ថានសហរដ្ឋអាមេរិក 54 ហើយតម្លៃ CHQ នៃ R. arenarum larvae ក៏ខ្ពស់ជាងតម្លៃនេះផងដែរ (CHQ> 388.67) ដែលសិក្សាបន្ទាប់ពី indic 388.600 ម៉ោង គ្រោះថ្នាក់ដល់ប្រភេទសត្វ amphibian ជាច្រើន។ ដោយពិចារណាថា P. gracilis ត្រូវការពេលប្រហែល 30 ថ្ងៃដើម្បីបញ្ចប់ metamorphosis56 វាអាចត្រូវបានសន្និដ្ឋានថាកំហាប់ដែលបានសិក្សានៃ cypermethrin អាចរួមចំណែកដល់ការថយចុះចំនួនប្រជាជនដោយការពារបុគ្គលដែលមានមេរោគមិនឱ្យចូលក្នុងដំណាក់កាលពេញវ័យឬបន្តពូជនៅវ័យក្មេង។
នៅក្នុងការវាយតម្លៃហានិភ័យដែលបានគណនានៃ micronuclei និងភាពមិនប្រក្រតីនៃនុយក្លេអ៊ែរ erythrocyte ផ្សេងទៀត តម្លៃ CHQ មានចាប់ពី 14.92 ដល់ 97.00 ដែលបង្ហាញថា cypermethrin មានហានិភ័យ genotoxic ដែលអាចកើតមានចំពោះ P. gracilis សូម្បីតែនៅក្នុងជម្រកធម្មជាតិរបស់វាក៏ដោយ។ ដោយគិតពីអត្រាមរណៈ កំហាប់អតិបរិមានៃសមាសធាតុ xenobiotic ដែលអាចទ្រាំទ្របានចំពោះ P. gracilis គឺ 4.24 μg L−1 ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយការប្រមូលផ្តុំទាបរហូតដល់ 1 μg / L ក៏បង្ហាញពីឥទ្ធិពល genotoxic ផងដែរ។ ការពិតនេះអាចនាំឱ្យមានការកើនឡើងនៃចំនួនបុគ្គលមិនធម្មតា 57 និងប៉ះពាល់ដល់ការអភិវឌ្ឍ និងការបន្តពូជនៃប្រភេទសត្វនៅក្នុងទីជម្រករបស់ពួកគេ ដែលនាំឱ្យមានការថយចុះនៃចំនួនប្រជាជន amphibian ។
ទម្រង់ពាណិជ្ជកម្មនៃថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត cypermethrin បានបង្ហាញពីការពុលស្រួចស្រាវ និងរ៉ាំរ៉ៃខ្ពស់ចំពោះ P. gracilis ។ អត្រាមរណៈកាន់តែខ្ពស់ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញ ទំនងជាដោយសារឥទ្ធិពលពុល ដូចដែលបានបង្ហាញដោយវត្តមានរបស់មីក្រូនុយក្លេអ៊ែរ និងភាពមិនប្រក្រតីនៃអ៊ីរីត្រូស៊ីត ជាពិសេសស្នូលស័រ ស្នូល lobed និងស្នូល vesicular ។ លើសពីនេះ ប្រភេទសត្វដែលបានសិក្សាបានបង្ហាញពីការកើនឡើងហានិភ័យបរិស្ថាន ទាំងស្រួចស្រាវ និងរ៉ាំរ៉ៃ។ ទិន្នន័យទាំងនេះ រួមជាមួយនឹងការសិក្សាពីមុនដោយក្រុមស្រាវជ្រាវរបស់យើង បានបង្ហាញថា សូម្បីតែការបង្កើតពាណិជ្ជកម្មផ្សេងគ្នានៃ cypermethrin នៅតែបណ្តាលឱ្យមានការថយចុះសកម្មភាព acetylcholinesterase (AChE) និង butyrylcholinesterase (BChE) និងភាពតានតឹងអុកស៊ីតកម្ម 58 ហើយបណ្តាលឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាពហែលទឹក និងភាពមិនប្រក្រតីនៃមាត់59 នៅក្នុង P. gracilis ដែលបង្ហាញថាមានសារធាតុពុល និងសារធាតុពុលក្នុងពាណិជ្ជកម្មខ្ពស់ ប្រភេទនេះ។ Hartmann et al ។ 60 បានរកឃើញថាទម្រង់ពាណិជ្ជកម្មនៃ cypermethrin គឺពុលបំផុតចំពោះ P. gracilis និងប្រភេទផ្សេងទៀតនៃ genus ដូចគ្នា (P. cuvieri) បើប្រៀបធៀបជាមួយនឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតប្រាំបួនផ្សេងទៀត។ នេះបង្ហាញថាការប្រមូលផ្តុំ cypermethrin ដែលត្រូវបានអនុម័តដោយស្របច្បាប់សម្រាប់ការការពារបរិស្ថានអាចបណ្តាលឱ្យមានអត្រាមរណភាពខ្ពស់ និងការថយចុះចំនួនប្រជាជនរយៈពេលវែង។
ការសិក្សាបន្ថែមគឺត្រូវការជាចាំបាច់ដើម្បីវាយតម្លៃការពុលថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតចំពោះសត្វពាហនៈ ដោយសារការប្រមូលផ្តុំដែលមាននៅក្នុងបរិស្ថានអាចបណ្តាលឱ្យមានអត្រាមរណភាពខ្ពស់ និងបង្កហានិភ័យសក្តានុពលដល់ P. gracilis ។ ការស្រាវជ្រាវលើប្រភេទសត្វ amphibian គួរតែត្រូវបានលើកទឹកចិត្ត ដោយសារតែទិន្នន័យអំពីសារពាង្គកាយទាំងនេះគឺខ្វះខាត ជាពិសេសលើប្រភេទសត្វប្រេស៊ីល។
ការធ្វើតេស្តជាតិពុលរ៉ាំរ៉ៃមានរយៈពេល 168 ម៉ោង (7 ថ្ងៃ) ក្រោមលក្ខខណ្ឌឋិតិវន្ត ហើយកំហាប់ sublethal គឺ: 1, 3, 6 និង 20 μg ai L−1 ។ នៅក្នុងការពិសោធន៍ទាំងពីរ កូនទន្សាយចំនួន 10 ក្នុងមួយក្រុមព្យាបាលត្រូវបានវាយតម្លៃដោយមានការចម្លងចំនួន 6 ក្បាល សម្រាប់ចំនួនសរុបចំនួន 60 tadpoles ក្នុងមួយកំហាប់។ ទន្ទឹមនឹងនេះ ការព្យាបាលដោយទឹកបានបម្រើជាការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមាន។ ការរៀបចំពិសោធន៍នីមួយៗមានចានកែវមាប់មគដែលមានសមត្ថភាព 500ml និងដង់ស៊ីតេ 1 tadpole ក្នុង 50ml នៃដំណោះស្រាយ។ ដបទឹកត្រូវបានគ្របដោយខ្សែភាពយន្តជ័រដើម្បីការពារការហួត ហើយត្រូវបានបញ្ចេញខ្យល់ជាបន្តបន្ទាប់។
ទឹកត្រូវបានវិភាគដោយគីមីដើម្បីកំណត់កំហាប់ថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតនៅ 0, 96, និង 168 ម៉ោង។ នេះបើយោងតាមលោក Sabin et al ។ 68 និង Martins et al ។ 69 ការវិភាគត្រូវបានអនុវត្តនៅមន្ទីរពិសោធន៍វិភាគថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត (LARP) នៃសាកលវិទ្យាល័យសហព័ន្ធនៃសាន់តាម៉ារីយ៉ាដោយប្រើក្រូម៉ាតូក្រាមឧស្ម័នដែលភ្ជាប់ជាមួយម៉ាស់បីបួនជ្រុង (គំរូវ៉ារ្យង់ 1200, Palo Alto រដ្ឋកាលីហ្វ័រញ៉ា សហរដ្ឋអាមេរិក)។ ការកំណត់បរិមាណនៃថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតក្នុងទឹកត្រូវបានបង្ហាញជាសម្ភារៈបន្ថែម (តារាង SM1)។
សម្រាប់ការធ្វើតេស្តមីក្រូនុយក្លេអ៊ែរ (MNT) និងការធ្វើតេស្តភាពមិនធម្មតានៃកោសិកាក្រហម (RNA) កូនទាចំនួន 15 ពីក្រុមព្យាបាលនីមួយៗត្រូវបានវិភាគ។ Tadpoles ត្រូវបានចាក់ថ្នាំស្ពឹកជាមួយនឹង 5% lidocaine (50 mg g-170) ហើយសំណាកឈាមត្រូវបានប្រមូលដោយការវាយបេះដូងដោយប្រើសឺរាុំង heparinized ចោល។ ការលាបឈាមត្រូវបានរៀបចំនៅលើស្លាយមីក្រូទស្សន៍ដែលគ្មានមេរោគ ខ្យល់ស្ងួត ជួសជុលជាមួយនឹងមេតាណុល 100% (4 °C) រយៈពេល 2 នាទី ហើយបន្ទាប់មកប្រឡាក់ជាមួយនឹងដំណោះស្រាយ Giemsa 10% រយៈពេល 15 នាទីក្នុងទីងងឹត។ នៅចុងបញ្ចប់នៃដំណើរការ ស្លាយត្រូវបានទឹកនាំទៅដោយទឹកចម្រោះ ដើម្បីលុបស្នាមប្រឡាក់លើស និងស្ងួតនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។
យ៉ាងហោចណាស់ 1000 RBCs ពី tadpole នីមួយៗត្រូវបានវិភាគដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍ 100× ជាមួយនឹងគោលបំណង 71 ដើម្បីកំណត់វត្តមានរបស់ MN និង ENA ។ សរុបចំនួន 75,796 RBCs ពី tadpoles ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយពិចារណាលើកំហាប់ cypermethrin និងការគ្រប់គ្រង។ Genotoxicity ត្រូវបានវិភាគយោងទៅតាមវិធីសាស្ត្ររបស់ Carrasco et al ។ និង Fenech et al.38,72 ដោយកំណត់ប្រេកង់នៃដំបៅនុយក្លេអ៊ែរខាងក្រោម: (1) កោសិកា anucleate: កោសិកាដោយគ្មានស្នូល; (2) កោសិកា apoptotic: ការបែកខ្ញែកនុយក្លេអ៊ែរ ការស្លាប់កោសិកាកម្មវិធី; (3) កោសិកា binucleate: កោសិកាដែលមានស្នូលពីរ; (4) ដុំពកនុយក្លេអ៊ែរ ឬកោសិកា bleb: កោសិកាដែលមានស្នូលជាមួយ protrusions តូចនៃភ្នាសនុយក្លេអ៊ែរ, blebs ទំហំស្រដៀងគ្នាទៅនឹង micronuclei; (5) កោសិកា karyolyzed: កោសិកាដែលមានតែគ្រោងនៃស្នូលដោយគ្មានសម្ភារៈខាងក្នុង; (6) កោសិកាដែលមានស្នាមរន្ធ៖ កោសិកាដែលមានស្នូលមានស្នាមប្រេះ ឬស្នាមរន្ធនៅក្នុងរាងរបស់វា ហៅថាស្នូលរាងក្រលៀន។ (7) កោសិកា lobulated: កោសិកាដែលមាន protrusions នុយក្លេអ៊ែរធំជាង vesicles ដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ; និង (8) microcells: កោសិកាដែលមានស្នូល condensed និងកាត់បន្ថយ cytoplasm ។ ការផ្លាស់ប្តូរត្រូវបានប្រៀបធៀបជាមួយនឹងលទ្ធផលត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមាន។
លទ្ធផលតេស្តជាតិពុលស្រួចស្រាវ (LC50) ត្រូវបានវិភាគដោយប្រើកម្មវិធី GBasic និង TSK-Trimmed Spearman-Karber method74។ ទិន្នន័យការធ្វើតេស្តរ៉ាំរ៉ៃត្រូវបានធ្វើតេស្តជាមុនសម្រាប់ភាពធម្មតានៃកំហុស (Shapiro-Wilks) និងភាពដូចគ្នានៃការប្រែប្រួល (Bartlett) ។ លទ្ធផលត្រូវបានគេវិភាគដោយប្រើការវិភាគមួយផ្លូវនៃការប្រែប្រួល (ANOVA)។ ការធ្វើតេស្តរបស់ Tukey ត្រូវបានប្រើដើម្បីប្រៀបធៀបទិន្នន័យក្នុងចំណោមពួកគេ ហើយការធ្វើតេស្តរបស់ Dunnett ត្រូវបានប្រើដើម្បីប្រៀបធៀបទិន្នន័យរវាងក្រុមព្យាបាល និងក្រុមត្រួតពិនិត្យអវិជ្ជមាន។
ទិន្នន័យ LOEC និង NOEC ត្រូវបានវិភាគដោយប្រើតេស្តរបស់ Dunnett ។ ការធ្វើតេស្តស្ថិតិត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើកម្មវិធី Statistica 8.0 (StatSoft) ដែលមានកម្រិតសារៈសំខាន់ 95% (p <0.05) ។
ពេលវេលាប្រកាស៖ ថ្ងៃទី ១៣ ខែមីនា ឆ្នាំ ២០២៥