សម្ភារៈរុក្ខជាតិ និងមេរោគ
ការគូសផែនទីសមាគម sorghum ដែលគេស្គាល់ថាជាចំនួនប្រជាជនបំប្លែង sorghum (SCP) ត្រូវបានផ្តល់ដោយវេជ្ជបណ្ឌិត Pat Brown នៅសាកលវិទ្យាល័យ Illinois (ឥឡូវនៅ UC Davis)។វាត្រូវបានពិពណ៌នាពីមុន និងជាបណ្តុំនៃខ្សែចម្រុះដែលបំប្លែងទៅជា photoperiod-insensitivity និងទំហំតូចជាងមុន ដើម្បីជួយសម្រួលដល់ការលូតលាស់ និងការអភិវឌ្ឍន៍របស់រុក្ខជាតិនៅក្នុងបរិស្ថានសហរដ្ឋអាមេរិក។510 បន្ទាត់ពីចំនួនប្រជាជននេះត្រូវបានគេប្រើនៅក្នុងការសិក្សានេះ ទោះបីជាដោយសារតែដំណុះមិនល្អ និងបញ្ហាត្រួតពិនិត្យគុណភាពផ្សេងទៀតក៏ដោយ មិនមែនគ្រប់បន្ទាត់ទាំងអស់ត្រូវបានគេប្រើក្នុងការវិភាគលក្ខណៈទាំងបីនោះទេ។ទីបំផុតទិន្នន័យពី 345 បន្ទាត់ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគនៃការឆ្លើយតប chitin, 472 បន្ទាត់សម្រាប់ការឆ្លើយតប flg22 និង 456 សម្រាប់ភាពធន់ទ្រាំ TLS ។ខ.ខូឃីស្ត្រេស LSLP18 ត្រូវបានទទួលពីវេជ្ជបណ្ឌិត Burt Bluhm នៅសាកលវិទ្យាល័យ Arkansas ។
ការវាស់វែងការឆ្លើយតប MAMP
MAMPs ពីរផ្សេងគ្នាត្រូវបានប្រើនៅក្នុងការសិក្សានេះ flg22 (កាតាឡុក Genscript # RP19986) និង chitin ។រុក្ខជាតិ Sorghum ត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុងសិលាចារឹកដាក់នៅលើផ្ទះល្វែងដែលពោរពេញទៅដោយដី (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) នៅក្នុងផ្ទះកញ្ចក់។រុក្ខជាតិត្រូវបានស្រោចទឹកមួយថ្ងៃមុនពេលប្រមូលគំរូ ដើម្បីជៀសវាងសំណើមស្លឹកបន្ថែមនៅថ្ងៃប្រមូល។
បន្ទាត់ត្រូវបានចៃដន្យហើយសម្រាប់ហេតុផលភ័ស្តុភារត្រូវបានគេដាំជាបាច់ចំនួន 60 ជួរ។សម្រាប់បន្ទាត់នីមួយៗ 'ផើង' ចំនួនបីត្រូវបានដាំដោយគ្រាប់ពូជពីរក្នុងមួយជួរ។បណ្តុំជាបន្តបន្ទាប់ត្រូវបានដាំភ្លាមៗនៅពេលដែលបាច់មុនត្រូវបានដំណើរការរហូតដល់ចំនួនប្រជាជនទាំងមូលត្រូវបានវាយតម្លៃ។ការរត់ការពិសោធន៍ចំនួនពីរត្រូវបានធ្វើឡើងសម្រាប់ MAMPs ទាំងពីរជាមួយនឹងប្រភេទហ្សែនដែលបានធ្វើឡើងវិញដោយចៃដន្យនៅក្នុងការរត់នីមួយៗ។
ការវិភាគ ROS ត្រូវបានអនុវត្តដូចដែលបានពិពណ៌នាពីមុន។ដោយសង្ខេប សម្រាប់ខ្សែនីមួយៗ គ្រាប់ពូជចំនួនប្រាំមួយត្រូវបានដាំនៅក្នុងផើងចំនួន 3 ផ្សេងគ្នា។ពីសំណាបលទ្ធផលបីត្រូវបានជ្រើសរើសដោយផ្អែកលើឯកសណ្ឋាន។សំណាបដែលមើលទៅមិនធម្មតា ឬមានកំពស់ខ្ពស់ ឬខ្លីជាងភាគច្រើនមិនត្រូវបានគេប្រើប្រាស់ទេ។ឌីសស្លឹកបួនដែលមានអង្កត់ផ្ចិត 3 ម.ម ត្រូវបានដកចេញពីផ្នែកដ៏ធំបំផុតនៃស្លឹកទី 4 នៃដើមសណ្ដែកដែលមានអាយុ 15 ថ្ងៃចំនួន 3 ផ្សេងគ្នា។មួយឌីសក្នុងមួយស្លឹកពីរុក្ខជាតិពីរ និងថាសពីរពីរុក្ខជាតិមួយ ដោយឌីសទីពីរក្លាយជាការគ្រប់គ្រងទឹក (សូមមើលខាងក្រោម)។ឌីសត្រូវបានអណ្តែតជាលក្ខណៈបុគ្គលនៅលើ 50 µl H20 នៅក្នុងចានអណ្តូង 96 ពណ៌ខ្មៅ បិទជិតដោយត្រាអាលុយមីញ៉ូម ដើម្បីជៀសវាងការប៉ះពាល់នឹងពន្លឺ និងរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ពេញមួយយប់។នៅព្រឹកបន្ទាប់ដំណោះស្រាយប្រតិកម្មត្រូវបានធ្វើឡើងដោយប្រើ 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, catalog #120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Type VI-A, Sigma-Aldrich, catalog # P6782) និង 100 mg/ml Chitin ឬ 2 μM នៃ Flg22 ។50 µl នៃដំណោះស្រាយប្រតិកម្មនេះត្រូវបានបន្ថែមទៅអណ្តូងបីក្នុងចំនោមអណ្តូងទាំងបួន។អណ្តូងទីបួនគឺជាការគ្រប់គ្រងចំអក ដែលដំណោះស្រាយប្រតិកម្មដែលមិនរាប់បញ្ចូល MAMP ត្រូវបានបន្ថែម។អណ្តូងទទេចំនួនបួនដែលមានតែទឹកក៏ត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងចាននីមួយៗផងដែរ។
បន្ទាប់ពីបន្ថែមដំណោះស្រាយប្រតិកម្ម ពន្លឺត្រូវបានវាស់ដោយប្រើ SynergyTM 2 multi-detection microplate reader (BioTek) រៀងរាល់ 2 នាទីក្នុងរយៈពេល 1 ម៉ោង។ឧបករណ៍អានចានយកការវាស់វែងពន្លឺរៀងរាល់ 2 នាទីក្នុងអំឡុងពេល 1 ម៉ោងនេះ។ផលបូកនៃការអានទាំង 31 ត្រូវបានគណនាដើម្បីផ្តល់តម្លៃសម្រាប់អណ្តូងនីមួយៗ។តម្លៃប៉ាន់ស្មានសម្រាប់ការឆ្លើយតប MAMP សម្រាប់ហ្សែននីមួយៗត្រូវបានគណនាជា (តម្លៃពន្លឺជាមធ្យមនៃអណ្តូងពិសោធន៍ទាំងបី—តម្លៃអណ្តូងគំរូ) -ដកតម្លៃអណ្តូងទទេជាមធ្យម។តម្លៃអណ្តូងទទេគឺជាប់លាប់ជិតសូន្យ។
ឌីសស្លឹករបស់នីកូទីណា បេនថាម៉ាយ៉ាណាបន្ទាត់ sorghum ឆ្លើយតបខ្ពស់មួយ (SC0003) និងបន្ទាត់ sorghum ឆ្លើយតបទាបមួយ (PI 6069) ក៏ត្រូវបានរួមបញ្ចូលផងដែរជាវត្ថុបញ្ជានៅក្នុងចាន 96 អណ្តូងនីមួយៗសម្រាប់គោលបំណងត្រួតពិនិត្យគុណភាព។
ខ.ខូឃីការរៀបចំ inoculum និង inoculation
ខ.ខូឃីinoculum ត្រូវបានរៀបចំដូចដែលបានពិពណ៌នាពីមុន។ដោយសង្ខេប គ្រាប់ធញ្ញជាតិ sorghum ត្រូវបានត្រាំក្នុងទឹករយៈពេល 3 ថ្ងៃ លាងជម្រះ ច្របល់ចូលទៅក្នុងដបរាងសាជី 1L និង autoclaved រយៈពេលមួយម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាព 15psi និង 121 °C។គ្រាប់ធញ្ញជាតិត្រូវបានចាក់បញ្ចូលជាមួយ mycelia ប្រហែល 5 មីលីលីត្រពីវប្បធម៌ស្រស់ខ.ខូឃីLSLP18 ញែកដាច់ពីគេ ហើយទុកចោលរយៈពេល 2 សប្តាហ៍នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ដោយអ្រងួនដបរៀងរាល់ 3 ថ្ងៃម្តង។បន្ទាប់ពី 2 សប្តាហ៍ ផ្សិតដែលជ្រៀតចូលគ្រាប់ធញ្ញជាតិ sorghum ត្រូវបានស្ងួតដោយខ្យល់ ហើយបន្ទាប់មករក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4 °C រហូតដល់ inoculation វាល។សារធាតុ inoculum ដូចគ្នានេះត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសាកល្បងទាំងមូល និងធ្វើឱ្យស្រស់ជារៀងរាល់ឆ្នាំ។សម្រាប់ការបង្កកំណើត គ្រាប់ធញ្ញជាតិដែលមានមេរោគ 6-10 ត្រូវបានគេដាក់ចូលទៅក្នុងទឹកនៃរុក្ខជាតិ sorghum ដែលមានអាយុ 4-5 សប្តាហ៍។ស្ព័រដែលផលិតចេញពីផ្សិតទាំងនេះចាប់ផ្តើមឆ្លងនៅក្នុងរុក្ខជាតិ sorghum វ័យក្មេងក្នុងរយៈពេលមួយសប្តាហ៍។
ការរៀបចំគ្រាប់ពូជ
មុនពេលដាំគ្រាប់ពូជ sorghum ត្រូវបានព្យាបាលដោយថ្នាំសម្លាប់មេរោគ ថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត និងល្បាយដែលមានសុវត្ថិភាពដែលមានសារធាតុសម្លាប់ផ្សិត Spirato 480 FS ~ 1%, ថ្នាំសម្លាប់ផ្សិត Sebring 480 FS, 3% Sorpro 940 ES មានសុវត្ថិភាពជាង។បន្ទាប់មកគ្រាប់ពូជត្រូវហាលខ្យល់រយៈពេល 3 ថ្ងៃ ដែលផ្តល់ស្រទាប់ស្តើងនៃល្បាយនេះជុំវិញគ្រាប់ពូជ។សុវត្ថិភាពជាងនេះអនុញ្ញាតឱ្យប្រើថ្នាំសំលាប់ស្មៅ Dual Magnum ជាការព្យាបាលមុនការកើត។
ការវាយតម្លៃនៃភាពធន់នឹងស្លឹកឈើគោលដៅ
SCP ត្រូវបានដាំនៅស្ថានីយ៍ស្រាវជ្រាវដំណាំកណ្តាលនៅ Clayton, NC នៅថ្ងៃទី 14-15 ខែមិថុនា ឆ្នាំ 2017 និងថ្ងៃទី 20 ខែមិថុនា ឆ្នាំ 2018 នៅក្នុងការរចនាប្លុកពេញលេញដោយចៃដន្យជាមួយនឹងការចម្លងពិសោធន៍ពីរនៅក្នុងករណីនីមួយៗ។ការពិសោធន៍ត្រូវបានដាំក្នុងជួរតែមួយ ១,៨ម ដែលមានទទឹងជួរ ០,៩ម ដោយប្រើគ្រាប់ ១០គ្រាប់ក្នុងមួយឡូត៍។ជួរព្រំដែនពីរត្រូវបានដាំនៅជុំវិញបរិវេណនៃការពិសោធន៍នីមួយៗដើម្បីការពារផលប៉ះពាល់គែម។ការពិសោធន៍ត្រូវបានចាក់បញ្ចូលនៅថ្ងៃទី 20 ខែកក្កដា ឆ្នាំ 2017 និងថ្ងៃទី 20 ខែកក្កដា ឆ្នាំ 2018 នៅចំណុចដែលរុក្ខជាតិ sorghum ស្ថិតក្នុងដំណាក់កាលលូតលាស់ទី 3 ។ ការវាយតម្លៃត្រូវបានគេយកតាមមាត្រដ្ឋានពី 1 ទៅ 9 ដែលរុក្ខជាតិដែលមិនមានសញ្ញានៃជំងឺត្រូវបានគេដាក់ពិន្ទុជាប្រាំបួន និងទាំងស្រុង។ រុក្ខជាតិងាប់ត្រូវបានគេដាក់ពិន្ទុជាមួយ។ការវាយតម្លៃចំនួនពីរត្រូវបានគេយកក្នុងឆ្នាំ 2017 និងការអានចំនួន 4 ក្នុងឆ្នាំ 2018 ដោយចាប់ផ្តើមពីរសប្តាហ៍បន្ទាប់ពីការចាក់បញ្ចូលជារៀងរាល់ឆ្នាំ។sAUDPC (តំបន់ស្តង់ដារក្រោមខ្សែកោងការវិវត្តនៃជំងឺ) ត្រូវបានគណនាដូចដែលបានពិពណ៌នាពីមុន។
ពេលវេលាប្រកាស៖ ០១-០១-២០២១