សូមអរគុណសម្រាប់ការទស្សនា Nature.com ។ កំណែរបស់កម្មវិធីរុករកតាមអ៊ីនធឺណិតដែលអ្នកកំពុងប្រើមានកម្រិតគាំទ្រ CSS ។ ដើម្បីទទួលបានលទ្ធផលល្អបំផុត យើងសូមណែនាំឱ្យអ្នកប្រើកំណែថ្មីនៃកម្មវិធីរុករកតាមអ៊ីនធឺណិតរបស់អ្នក (ឬបិទមុខងារភាពឆបគ្នានៅក្នុង Internet Explorer)។ ក្នុងពេលនេះ ដើម្បីធានាបាននូវការគាំទ្រជាបន្ត យើងកំពុងបង្ហាញគេហទំព័រដោយមិនប្រើរចនាប័ទ្ម ឬ JavaScript។
ការរួមផ្សំនៃសមាសធាតុថ្នាំសំលាប់សត្វល្អិតដែលកើតចេញពីរុក្ខជាតិអាចបង្ហាញនូវអន្តរកម្មរួម ឬអន្តរកម្មប្រឆាំងនឹងសត្វល្អិត។ ដោយសារការរីករាលដាលយ៉ាងឆាប់រហ័សនៃជំងឺដែលដឹកដោយមូស Aedes និងការកើនឡើងនៃភាពធន់របស់ប្រជាជនមូស Aedes ទៅនឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតបែបប្រពៃណី ការរួមផ្សំចំនួន 28 នៃសមាសធាតុ terpene ដោយផ្អែកលើប្រេងសំខាន់ៗរុក្ខជាតិត្រូវបានបង្កើត និងធ្វើតេស្តប្រឆាំងនឹងដំណាក់កាលដង្កូវ និងមនុស្សពេញវ័យរបស់ Aedes aegypti ។ ប្រេងសំខាន់ៗរុក្ខជាតិចំនួនប្រាំ (EOs) ត្រូវបានវាយតម្លៃដំបូងសម្រាប់ប្រសិទ្ធភាពនៃការប្រើប្រាស់ដង្កូវនាង និងមនុស្សពេញវ័យ ហើយសមាសធាតុសំខាន់ៗចំនួនពីរត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណនៅក្នុង EO នីមួយៗដោយផ្អែកលើលទ្ធផល GC-MS ។ សមាសធាតុដែលបានកំណត់អត្តសញ្ញាណសំខាន់ៗត្រូវបានទិញគឺ diallyl disulfide, diallyl trisulfide, carvone, limonene, eugenol, methyl eugenol, eucalyptol, eudesmol និងមូស alpha-pinene ។ បន្ទាប់មកបន្សំគោលពីរនៃសមាសធាតុទាំងនេះត្រូវបានរៀបចំដោយប្រើកម្រិតថ្នាំ sublethal ហើយឥទ្ធិពលរួម និងឥទ្ធិពលប្រឆាំងរបស់ពួកគេត្រូវបានសាកល្បង និងកំណត់។ សមាសធាតុថ្នាំសំលាប់មេរោគដ៏ល្អបំផុតគឺទទួលបានដោយការលាយ limonene ជាមួយ diallyl disulfide ហើយសមាសធាតុផ្សំថ្នាំសំលាប់មេរោគដ៏ល្អបំផុតគឺទទួលបានដោយការលាយ carvone ជាមួយ limonene។ ថ្នាំសំលាប់ដង្កូវសំយោគ Temphos និងថ្នាំមនុស្សពេញវ័យ Malathion ត្រូវបានសាកល្បងដោយឡែកពីគ្នា និងក្នុងបន្សំគោលពីរជាមួយថ្នាំ terpenoids ។ លទ្ធផលបានបង្ហាញថាការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ temephos និង diallyl disulfide និង malathion និង eudesmol គឺជាការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏មានប្រសិទ្ធភាពបំផុត។ បន្សំដ៏មានអានុភាពទាំងនេះមានសក្តានុពលសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ។
ប្រេងសំខាន់ៗរុក្ខជាតិ (EOs) គឺជាសារធាតុមេតាបូលីតបន្ទាប់បន្សំដែលមានសមាសធាតុជីវសកម្មផ្សេងៗ ហើយកាន់តែមានសារៈសំខាន់ជាជម្រើសជំនួសថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសំយោគ។ ពួកវាមិនត្រឹមតែមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថាន និងងាយស្រួលប្រើប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែវាក៏ជាល្បាយនៃសមាសធាតុជីវសកម្មផ្សេងៗគ្នា ដែលជួយកាត់បន្ថយលទ្ធភាពនៃការវិវត្តន៍ភាពធន់នឹងថ្នាំផងដែរ។ ដោយប្រើបច្ចេកវិទ្យា GC-MS អ្នកស្រាវជ្រាវបានពិនិត្យធាតុផ្សំនៃប្រេងសំខាន់ៗរុក្ខជាតិផ្សេងៗ និងបានកំណត់អត្តសញ្ញាណសមាសធាតុជាង 3,000 ពីរុក្ខជាតិក្រអូប 17,500 ដើម ដែលភាគច្រើនត្រូវបានសាកល្បងសម្រាប់លក្ខណៈសម្បត្តិថ្នាំសំលាប់សត្វល្អិត ហើយត្រូវបានគេរាយការណ៍ថាមានឥទ្ធិពលសម្លាប់សត្វល្អិត3,4។ ការសិក្សាមួយចំនួនបានគូសបញ្ជាក់ថា ការពុលនៃសមាសធាតុសំខាន់របស់សមាសធាតុគឺដូចគ្នា ឬធំជាងអុកសុីតអេទីឡែនឆៅរបស់វា។ ប៉ុន្តែការប្រើប្រាស់សមាសធាតុបុគ្គលម្តងទៀតអាចទុកកន្លែងសម្រាប់ការអភិវឌ្ឍនៃភាពធន់ដូចទៅនឹងថ្នាំសំលាប់សត្វល្អិតគីមី 5,6 ។ ដូច្នេះ ការផ្តោតអារម្មណ៍នាពេលបច្ចុប្បន្នគឺលើការរៀបចំល្បាយនៃសមាសធាតុដែលមានមូលដ្ឋានលើអេទីឡែនអុកស៊ីដ ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាពថ្នាំសំលាប់សត្វល្អិត និងកាត់បន្ថយលទ្ធភាពនៃការធន់ទ្រាំនឹងចំនួនសត្វល្អិតគោលដៅ។ សមាសធាតុសកម្មបុគ្គលដែលមានវត្តមាននៅក្នុង EOs អាចបង្ហាញពីឥទ្ធិពលរួម ឬប្រឆាំងនៅក្នុងការរួមផ្សំដែលឆ្លុះបញ្ចាំងពីសកម្មភាពទាំងមូលនៃ EO ដែលជាការពិតដែលត្រូវបានសង្កត់ធ្ងន់យ៉ាងល្អនៅក្នុងការសិក្សាដែលធ្វើឡើងដោយអ្នកស្រាវជ្រាវពីមុន7,8។ កម្មវិធីត្រួតពិនិត្យវ៉ិចទ័រក៏រួមបញ្ចូល EO និងសមាសធាតុរបស់វាផងដែរ។ សកម្មភាពសម្លាប់មូសនៃប្រេងសំខាន់ៗត្រូវបានសិក្សាយ៉ាងទូលំទូលាយលើសត្វមូស Culex និង Anopheles ។ ការសិក្សាជាច្រើនបានព្យាយាមបង្កើតថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតដែលមានប្រសិទ្ធភាពដោយរួមបញ្ចូលគ្នានូវរុក្ខជាតិផ្សេងៗជាមួយនឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសំយោគដែលត្រូវបានប្រើប្រាស់ជាលក្ខណៈពាណិជ្ជកម្មដើម្បីបង្កើនជាតិពុលរួម និងកាត់បន្ថយផលប៉ះពាល់ 9. ប៉ុន្តែការសិក្សាអំពីសមាសធាតុបែបនេះប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti នៅតែកម្រ។ ភាពជឿនលឿននៃវិទ្យាសាស្ត្រវេជ្ជសាស្ត្រ និងការអភិវឌ្ឍន៍ថ្នាំ និងវ៉ាក់សាំងបានជួយប្រយុទ្ធប្រឆាំងនឹងជំងឺដែលឆ្លងតាមវ៉ិចទ័រមួយចំនួន។ ប៉ុន្តែវត្តមាននៃប្រភេទមេរោគផ្សេងគ្នាដែលចម្លងដោយមូស Aedes aegypti បាននាំឱ្យកម្មវិធីចាក់វ៉ាក់សាំងបរាជ័យ។ ដូច្នេះនៅពេលដែលជំងឺបែបនេះកើតឡើង កម្មវិធីត្រួតពិនិត្យវ៉ិចទ័រគឺជាជម្រើសតែមួយគត់ដើម្បីការពារការរីករាលដាលនៃជំងឺនេះ។ នៅក្នុងស្ថានភាពបច្ចុប្បន្ន ការគ្រប់គ្រងរបស់ Aedes aegypti គឺមានសារៈសំខាន់ខ្លាំងណាស់ព្រោះវាជាវ៉ិចទ័រសំខាន់នៃមេរោគផ្សេងៗ និងប្រភេទរបស់វាដែលបង្កឱ្យមានជំងឺគ្រុនឈាម Zika គ្រុនឈាម គ្រុនឈាម គ្រុនលឿង ជាដើម អ្វីដែលគួរអោយកត់សំគាល់បំផុតនោះគឺថាចំនួនករណីស្ទើរតែទាំងអស់នៃជំងឺ Aedes-borne អេហ្ស៊ីបកំពុងកើនឡើងជារៀងរាល់ឆ្នាំ។ ដូច្នេះហើយ ក្នុងបរិបទនេះ ចាំបាច់ត្រូវបង្កើតវិធានការត្រួតពិនិត្យប្រកបដោយភាពស្និទ្ធស្នាលនឹងបរិស្ថាន និងមានប្រសិទ្ធភាពសម្រាប់ប្រជាជន Aedes aegypti ។ បេក្ខជនដែលមានសក្តានុពលក្នុងន័យនេះគឺ EOs សមាសធាតុផ្សំ និងបន្សំរបស់ពួកគេ។ ដូច្នេះហើយ ការសិក្សានេះបានព្យាយាមកំណត់នូវការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏មានប្រសិទ្ធភាពនៃសមាសធាតុ EO សំខាន់ៗរបស់រុក្ខជាតិពីរុក្ខជាតិចំនួន 5 ដែលមានលក្ខណៈសម្បត្តិថ្នាំសំលាប់សត្វល្អិត (ឧទាហរណ៍ ជីអង្កាម ស្លឹកគ្រៃ អ៊ីកាលីបតឹស ស្ពាន់ធ័រ Allium និង melaleuca) ប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ។
EOs ទាំងអស់ដែលបានជ្រើសរើសបានបង្ហាញពីសកម្មភាពដែលអាចសម្លាប់សត្វដង្កូវបានប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ជាមួយនឹង 24-h LC50 ចាប់ពី 0.42 ដល់ 163.65 ppm ។ សកម្មភាពសម្លាប់សត្វដង្កូវខ្ពស់បំផុតត្រូវបានកត់ត្រាសម្រាប់ម្ទេស (Mp) EO ដែលមានតម្លៃ LC50 នៃ 0.42 ppm នៅ 24 ម៉ោង បន្ទាប់មកដោយខ្ទឹមស (As) ជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 នៃ 16.19 ppm នៅ 24 ម៉ោង (តារាងទី 1) ។
ជាមួយនឹងករណីលើកលែងនៃ Ocimum Sainttum, Os EO EOs ទាំងបួនផ្សេងទៀតដែលបានបញ្ចាំងបានបង្ហាញពីផលប៉ះពាល់នៃប្រតិកម្មអាឡែហ្ស៊ីជាក់ស្តែងជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 ចាប់ពី 23.37 ដល់ 120.16 ppm ក្នុងរយៈពេលនៃការប៉ះពាល់ 24 ម៉ោង។ Thymophilus striata (Cl) EO មានប្រសិទ្ធភាពបំផុតក្នុងការសម្លាប់មនុស្សពេញវ័យដែលមានតម្លៃ LC50 នៃ 23.37 ppm ក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោងបន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់ បន្ទាប់មកដោយ Eucalyptus maculata (Em) ដែលមានតម្លៃ LC50 នៃ 101.91 ppm (តារាងទី 1)។ ម៉្យាងវិញទៀតតម្លៃ LC50 សម្រាប់ Os មិនទាន់ត្រូវបានកំណត់នៅឡើយទេ ដោយសារអត្រាមរណភាពខ្ពស់បំផុត 53% ត្រូវបានកត់ត្រាក្នុងកម្រិតខ្ពស់បំផុត (រូបភាពបន្ថែមទី 3)។
សមាសធាតុផ្សំសំខាន់ពីរនៅក្នុង EO នីមួយៗត្រូវបានកំណត់ និងជ្រើសរើសដោយផ្អែកលើលទ្ធផលមូលដ្ឋានទិន្នន័យបណ្ណាល័យ NIST, ភាគរយនៃតំបន់ក្រូម៉ាតូក្រាម GC និងលទ្ធផល MS spectra (តារាង 2)។ សម្រាប់ EO As សមាសធាតុសំខាន់ៗដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណគឺ diallyl disulfide និង diallyl trisulfide; សម្រាប់ EO Mp សមាសធាតុសំខាន់ៗដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណគឺ carvone និង limonene សម្រាប់ EO Em សមាសធាតុសំខាន់ៗដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណគឺ eudesmol និង eucalyptol ។ សម្រាប់ EO Os សមាសធាតុសំខាន់ៗដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណគឺ eugenol និង methyl eugenol ហើយសម្រាប់ EO Cl សមាសធាតុសំខាន់ៗដែលត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណគឺ eugenol និង α-pinene (រូបភាពទី 1 រូបបន្ថែម 5–8 តារាងបន្ថែម 1–5) ។
លទ្ធផលនៃបរិមាណនៃសារធាតុ terpenoids សំខាន់ៗនៃប្រេងសំខាន់ៗដែលបានជ្រើសរើស (A-diallyl disulfide; B-diallyl trisulfide; C-eugenol; D-methyl eugenol; E-limonene; F-aromatic ceperone; G-α-pinene; H-cineole; R-eudamol) ។
សមាសធាតុសរុបចំនួនប្រាំបួន (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eugenol, methyl eugenol, carvone, limonene, eucalyptol, eudesmol, α-pinene) ត្រូវបានគេកំណត់ថាជាសមាសធាតុមានប្រសិទ្ធភាពដែលជាសមាសធាតុសំខាន់នៃ EO ហើយត្រូវបាន bioassayed ជាលក្ខណៈបុគ្គលប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ។ . សមាសធាតុ eudesmol មានសកម្មភាពសម្លាប់ដង្កូវខ្ពស់បំផុតជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 នៃ 2.25 ppm បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់រយៈពេល 24 ម៉ោង។ សមាសធាតុ diallyl disulfide និង diallyl trisulfide ក៏ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានឥទ្ធិពលលើដង្កូវស៊ីផងដែរ ជាមួយនឹងកម្រិតថ្នាំ sublethal ជាមធ្យមក្នុងចន្លោះពី 10-20 ppm ។ សកម្មភាព larvicidal កម្រិតមធ្យមត្រូវបានគេសង្កេតឃើញម្តងទៀតចំពោះសមាសធាតុ eugenol, limonene និង eucalyptol ដែលមានតម្លៃ LC50 នៃ 63.35 ppm, 139.29 ppm ។ និង 181.33 ppm បន្ទាប់ពី 24 ម៉ោងរៀងគ្នា (តារាងទី 3) ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ គ្មានសក្តានុពលនៃសារធាតុ larvicidal ដ៏សំខាន់នៃ methyl eugenol និង carvone ត្រូវបានគេរកឃើញសូម្បីតែក្នុងកម្រិតខ្ពស់បំផុត ដូច្នេះតម្លៃ LC50 មិនត្រូវបានគេគណនា (តារាង 3) ។ ថ្នាំសំលាប់ដង្កូវសំយោគ Temephos មានកំហាប់ដ៍សាហាវជាមធ្យម 0.43 ppm ប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោងនៃការប៉ះពាល់ (តារាងទី 3 តារាងបន្ថែម 6) ។
សមាសធាតុចំនួនប្រាំពីរ (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eucalyptol, α-pinene, eudesmol, limonene និង carvone) ត្រូវបានគេកំណត់ថាជាសមាសធាតុសំខាន់នៃ EO ដែលមានប្រសិទ្ធភាព ហើយត្រូវបានធ្វើតេស្តជាលក្ខណៈបុគ្គលប្រឆាំងនឹងមូស Aedes អេហ្ស៊ីបពេញវ័យ។ យោងតាមការវិភាគតំរែតំរង់របស់ Probit Eudesmol ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានសក្តានុពលខ្ពស់បំផុតជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 នៃ 1.82 ppm បន្ទាប់មកដោយ Eucalyptol ជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 នៃ 17.60 ppm នៅពេលវេលាប៉ះពាល់ 24 ម៉ោង។ សមាសធាតុចំនួន 5 ដែលនៅសេសសល់ដែលត្រូវបានធ្វើតេស្តគឺមានគ្រោះថ្នាក់កម្រិតមធ្យមចំពោះមនុស្សពេញវ័យដែលមាន LC50s ចាប់ពី 140.79 ដល់ 737.01 ppm (តារាងទី 3)។ សារធាតុ organophosphorus malathion សំយោគមានថាមពលតិចជាង eudesmol និងខ្ពស់ជាងសមាសធាតុប្រាំមួយផ្សេងទៀត ជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 នៃ 5.44 ppm ក្នុងរយៈពេលនៃការប៉ះពាល់ 24 ម៉ោង (តារាងទី 3 តារាងបន្ថែម 6) ។
សមាសធាតុនាំមុខដ៏មានឥទ្ធិពលចំនួនប្រាំពីរ និងសារធាតុ organophosphorus tamephosate ត្រូវបានជ្រើសរើសដើម្បីបង្កើតបន្សំគោលពីរនៃដូស LC50 របស់ពួកគេក្នុងសមាមាត្រ 1: 1 ។ ការរួមផ្សំប្រព័ន្ធគោលពីរសរុបចំនួន 28 ត្រូវបានរៀបចំ និងធ្វើតេស្តសម្រាប់ប្រសិទ្ធភាពថ្នាំសំលាប់មេរោគរបស់ពួកគេប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ។ ការរួមផ្សំចំនួន 9 ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នា ការរួមផ្សំចំនួន 14 គឺមានលក្ខណៈប្រឆាំង ហើយការរួមផ្សំចំនួន 5 មិនមែនជាថ្នាំសំលាប់មេរោគ។ ក្នុងចំណោមការរួមផ្សំគ្នា ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ diallyl disulfide និង temofol គឺមានប្រសិទ្ធភាពបំផុត ដោយអត្រាមរណភាព 100% ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញបន្ទាប់ពី 24 ម៉ោង (តារាងទី 4) ។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ ល្បាយនៃ limonene ជាមួយ diallyl disulfide និង eugenol ជាមួយ thymetphos បានបង្ហាញពីសក្តានុពលដ៏ល្អជាមួយនឹងអត្រាមរណភាពដង្កូវដែលបានសង្កេតឃើញ 98.3% (តារាង 5) ។ បន្សំ 4 ដែលនៅសេសសល់គឺ eudesmol បូក eucalyptol, eudesmol បូក limonene, eucalyptol បូក alpha-pinene, alpha-pinene បូក temephos ក៏បានបង្ហាញពីប្រសិទ្ធភាពនៃការសំលាប់ដង្កូវយ៉ាងសំខាន់ជាមួយនឹងអត្រាមរណភាពដែលត្រូវបានសង្កេតឃើញលើសពី 90% ។ អត្រាមរណៈដែលរំពឹងទុកគឺជិត 60-75% ។ (តារាងទី 4) ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ limonene ជាមួយ α-pinene ឬ eucalyptus បានបង្ហាញពីប្រតិកម្មប្រឆាំង។ ដូចគ្នានេះដែរ ល្បាយនៃ Temephos ជាមួយ eugenol ឬ eucalyptus ឬ eudesmol ឬ diallyl trisulfide ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានឥទ្ធិពលប្រឆាំង។ ដូចគ្នានេះដែរ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ diallyl disulfide និង diallyl trisulfide និងការរួមផ្សំនៃសមាសធាតុទាំងពីរនេះជាមួយ eudesmol ឬ eugenol គឺប្រឆាំងនៅក្នុងសកម្មភាព larvicidal របស់ពួកគេ។ ការប្រឆាំងត្រូវបានគេរាយការណ៍ផងដែរជាមួយនឹងការរួមផ្សំនៃ eudesmol ជាមួយ eugenol ឬ α-pinene ។
ក្នុងចំណោមល្បាយគោលពីរទាំងអស់ 28 ដែលត្រូវបានសាកល្បងសម្រាប់សកម្មភាពអាស៊ីតពេញវ័យ 7 ផ្សំគឺមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នា 6 មិនមានផលប៉ះពាល់ និង 15 ជាការប្រឆាំង។ ល្បាយនៃ eudesmol ជាមួយ eucalyptus និង limonene ជាមួយ carvone ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានប្រសិទ្ធភាពជាងការផ្សំរួមផ្សំផ្សេងទៀត ជាមួយនឹងអត្រាមរណភាពនៅ 24 ម៉ោង 76% និង 100% រៀងគ្នា (តារាងទី 5)។ Malathion ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញដើម្បីបង្ហាញប្រសិទ្ធភាពរួមជាមួយនឹងការរួមផ្សំនៃសមាសធាតុទាំងអស់លើកលែងតែ limonene និង diallyl trisulfide ។ ម្យ៉ាងវិញទៀត ភាពប្រឆាំងត្រូវបានគេរកឃើញរវាង diallyl disulfide និង diallyl trisulfide និងការបញ្ចូលគ្នានៃពួកវាជាមួយ eucalyptus ឬ eucalyptol ឬ carvone ឬ limonene ។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ α-pinene ជាមួយ eudesmol ឬ limonene, eucalyptol ជាមួយ carvone ឬ limonene និង limonene ជាមួយ eudesmol ឬ malathion បានបង្ហាញពីឥទ្ធិពលប្រឆាំងនឹងដង្កូវនាង។ សម្រាប់បន្សំចំនួនប្រាំមួយដែលនៅសល់ មិនមានភាពខុសប្លែកគ្នាខ្លាំងរវាងការរំពឹងទុក និងមរណភាពដែលបានសង្កេតឃើញទេ (តារាងទី 5)។
ដោយផ្អែកលើឥទ្ធិពលរួម និងកម្រិតថ្នាំ sublethal ការពុលដង្កូវរបស់ពួកគេប្រឆាំងនឹងមូស Aedes aegypti មួយចំនួនធំនៅទីបំផុតត្រូវបានជ្រើសរើស និងធ្វើតេស្តបន្ថែមទៀត។ លទ្ធផលបានបង្ហាញថាការស្លាប់ដង្កូវបានសង្កេតឃើញដោយប្រើបន្សំគោលពីរ eugenol-limonene, diallyl disulfide-limonene និង diallyl disulfide-timephos គឺ 100% ខណៈពេលដែលការស្លាប់ដង្កូវបានរំពឹងទុកគឺ 76.48%, 72.16% និង 63.4% រៀងគ្នា (តារាង)។ . ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ limonene និង eudesmol គឺមិនសូវមានប្រសិទ្ធភាពទេ ជាមួយនឹងការស្លាប់ដង្កូវ 88% ត្រូវបានអង្កេតក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោង (តារាង 6) ។ សរុបមក ការរួមផ្សំប្រព័ន្ធគោលពីរដែលបានជ្រើសរើសចំនួន 4 ក៏បានបង្ហាញពីប្រសិទ្ធភាពនៃ larvicidal synergistic ប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti នៅពេលអនុវត្តលើទ្រង់ទ្រាយធំ (តារាង 6) ។
ការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏ស៊ីសង្វាក់ចំនួនបីត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ bioassay សម្រាប់មនុស្សពេញវ័យ ដើម្បីគ្រប់គ្រងចំនួនប្រជាជនដ៏ធំនៃមនុស្សពេញវ័យ Aedes aegypti ។ ដើម្បីជ្រើសរើសបន្សំដើម្បីសាកល្បងលើអាណានិគមសត្វល្អិតធំៗ ដំបូងឡើយ យើងបានផ្តោតទៅលើការរួមផ្សំ terpene ដ៏ល្អបំផុតពីរគឺ carvone បូក limonene និង eucalyptol បូក eudesmol ។ ទីពីរ ការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏ស៊ីសង្វាក់គ្នាដ៏ល្អបំផុតត្រូវបានជ្រើសរើសពីការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ malathion organophosphate សំយោគ និង terpenoids ។ យើងជឿថាការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ malathion និង eudesmol គឺជាការរួមផ្សំដ៏ល្អបំផុតសម្រាប់ការធ្វើតេស្តលើអាណានិគមសត្វល្អិតធំៗ ដោយសារតែអត្រាមរណភាពដែលត្រូវបានគេសង្កេតឃើញខ្ពស់បំផុត និងតម្លៃ LC50 ទាបបំផុតនៃគ្រឿងផ្សំបេក្ខជន។ Malathion បង្ហាញភាពស៊ីសង្វាក់គ្នាក្នុងការរួមបញ្ចូលគ្នាជាមួយ α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptus, carvone និង eudesmol ។ ប៉ុន្តែប្រសិនបើយើងក្រឡេកមើលតម្លៃ LC50 នោះ Eudesmol មានតម្លៃទាបបំផុត (2.25 ppm) ។ តម្លៃ LC50 ដែលបានគណនានៃ malathion, α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptol និង carvone គឺ 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 និង 140.79 ppm ។ រៀងៗខ្លួន។ តម្លៃទាំងនេះបង្ហាញថាការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ malathion និង eudesmol គឺជាការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏ល្អប្រសើរនៅក្នុងលក្ខខណ្ឌនៃកិតើ។ លទ្ធផលបានបង្ហាញថា ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ carvone បូក limonene និង eudesmol plus malathion មានអត្រាមរណភាព 100% បើធៀបនឹងការរំពឹងទុកនៃការស្លាប់ពី 61% ទៅ 65% ។ ការរួមបញ្ចូលគ្នាមួយទៀតគឺ eudesmol បូកនឹង eucalyptol បានបង្ហាញពីអត្រាមរណភាព 78.66% បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់រយៈពេល 24 ម៉ោងធៀបនឹងអត្រាមរណភាពដែលរំពឹងទុក 60% ។ បន្សំដែលបានជ្រើសរើសទាំងបីបានបង្ហាញឱ្យឃើញពីប្រសិទ្ធភាពរួម សូម្បីតែនៅពេលអនុវត្តក្នុងទ្រង់ទ្រាយធំប្រឆាំងនឹងមនុស្សពេញវ័យ Aedes aegypti (តារាង 6) ។
នៅក្នុងការសិក្សានេះ EOs រុក្ខជាតិដែលបានជ្រើសរើសដូចជា Mp, As, Os, Em និង Cl បានបង្ហាញពីឥទ្ធិពលដ៍សាហាវលើដំណាក់កាលដង្កូវ និងមនុស្សពេញវ័យនៃ Aedes aegypti ។ Mp EO មានសកម្មភាពសម្លាប់ដង្កូវខ្ពស់បំផុតជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 នៃ 0.42 ppm បន្ទាប់មកដោយ As, Os និង Em EOs ដែលមានតម្លៃ LC50 តិចជាង 50 ppm បន្ទាប់ពី 24 ម៉ោង។ លទ្ធផលទាំងនេះគឺស្របនឹងការសិក្សាមុនៗអំពីមូស និងរុយដែលមានភាពកខ្វក់ផ្សេងទៀត១០,១១,១២,១៣,១៤។ ថ្វីត្បិតតែកម្លាំងដង្កូវស៊ីរបស់ Cl គឺទាបជាងប្រេងសំខាន់ៗដទៃទៀត ដោយមានតម្លៃ LC50 នៃ 163.65 ppm បន្ទាប់ពី 24 ម៉ោងក៏ដោយ សក្តានុពលសម្រាប់មនុស្សពេញវ័យរបស់វាគឺខ្ពស់បំផុតជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 នៃ 23.37 ppm បន្ទាប់ពី 24 ម៉ោង។ Mp, As និង Em EOs ក៏បានបង្ហាញពីសក្តានុពលអាឡែរហ្សីដ៏ល្អជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 ក្នុងចន្លោះពី 100-120 ppm នៅ 24 ម៉ោងនៃការប៉ះពាល់ ប៉ុន្តែមានកម្រិតទាបជាងប្រសិទ្ធភាពនៃការសម្លាប់កូនកណ្តុររបស់ពួកគេ។ ម៉្យាងវិញទៀត EO Os បានបង្ហាញនូវឥទ្ធិពលអាឡែហ្ស៊ីដែលធ្វេសប្រហែស សូម្បីតែក្នុងកម្រិតព្យាបាលខ្ពស់បំផុតក៏ដោយ។ ដូច្នេះហើយ លទ្ធផលបង្ហាញថា ការពុលនៃអេទីឡែនអុកស៊ីដចំពោះរុក្ខជាតិអាចប្រែប្រួលអាស្រ័យលើដំណាក់កាលលូតលាស់របស់មូស15។ វាក៏អាស្រ័យលើអត្រានៃការជ្រៀតចូលនៃ EOs ចូលទៅក្នុងរាងកាយរបស់សត្វល្អិត អន្តរកម្មរបស់ពួកគេជាមួយនឹងអង់ស៊ីមគោលដៅជាក់លាក់ និងសមត្ថភាពបន្សាបជាតិពុលរបស់មូសនៅដំណាក់កាលអភិវឌ្ឍន៍នីមួយៗ 16 ។ ការសិក្សាមួយចំនួនធំបានបង្ហាញថា សមាសធាតុផ្សំសំខាន់គឺជាកត្តាសំខាន់ក្នុងសកម្មភាពជីវសាស្រ្តនៃអេទីឡែនអុកស៊ីដ ព្រោះវាមានចំណែកភាគច្រើននៃសមាសធាតុសរុប 3,12,17,18។ ដូច្នេះ យើងបានពិចារណាសមាសធាតុសំខាន់ពីរនៅក្នុង EO នីមួយៗ។ ដោយផ្អែកលើលទ្ធផល GC-MS, diallyl disulfide និង diallyl trisulfide ត្រូវបានកំណត់ថាជាសមាសធាតុសំខាន់នៃ EO As ដែលស្របនឹងរបាយការណ៍មុន 19,20,21។ ទោះបីជារបាយការណ៍ពីមុនបានបង្ហាញថា menthol គឺជាសមាសធាតុសំខាន់មួយរបស់វាក៏ដោយ carvone និង limonene ត្រូវបានកំណត់ម្តងទៀតថាជាសមាសធាតុសំខាន់នៃ Mp EO22,23 ។ ទម្រង់សមាសភាពនៃ Os EO បានបង្ហាញថា eugenol និង methyl eugenol គឺជាសមាសធាតុសំខាន់ដែលស្រដៀងនឹងការរកឃើញរបស់អ្នកស្រាវជ្រាវមុន16,24។ Eucalyptol និង eucalyptol ត្រូវបានគេរាយការណ៍ថាជាសមាសធាតុសំខាន់ដែលមាននៅក្នុងប្រេងស្លឹក Em ដែលវាស៊ីគ្នានឹងការរកឃើញរបស់អ្នកស្រាវជ្រាវមួយចំនួន 25,26 ប៉ុន្តែផ្ទុយទៅនឹងការរកឃើញរបស់ Olalade et al.27 ។ ភាពលេចធ្លោនៃ cineole និង α-pinene ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងប្រេងសំខាន់ៗ melaleuca ដែលស្រដៀងនឹងការសិក្សាមុន 28,29 ។ ភាពខុសប្លែកគ្នាក្នុងលក្ខណៈជាក់លាក់នៅក្នុងសមាសភាព និងការប្រមូលផ្តុំនៃប្រេងសំខាន់ៗដែលចម្រាញ់ចេញពីប្រភេទរុក្ខជាតិដូចគ្នានៅក្នុងទីតាំងផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានគេរាយការណ៍ ហើយត្រូវបានគេសង្កេតឃើញផងដែរនៅក្នុងការសិក្សានេះ ដែលត្រូវបានជះឥទ្ធិពលដោយលក្ខខណ្ឌលូតលាស់របស់រុក្ខជាតិតាមភូមិសាស្ត្រ រយៈពេលប្រមូលផល ដំណាក់កាលអភិវឌ្ឍន៍ ឬអាយុរុក្ខជាតិ។ រូបរាងនៃគីមីវិទ្យាល.22,30,31,32។ បន្ទាប់មក សមាសធាតុដែលបានកំណត់អត្តសញ្ញាណសំខាន់ៗត្រូវបានទិញ និងធ្វើតេស្តសម្រាប់ប្រសិទ្ធភាព និងផលប៉ះពាល់នៃដង្កូវរបស់វាទៅលើសត្វមូស Aedes aegypti មនុស្សពេញវ័យ។ លទ្ធផលបានបង្ហាញថាសកម្មភាព larvicidal នៃ diallyl disulfide គឺអាចប្រៀបធៀបទៅនឹងប្រេងឆៅ EO As ។ ប៉ុន្តែសកម្មភាពរបស់ diallyl trisulfide គឺខ្ពស់ជាង EO As ។ លទ្ធផលទាំងនេះគឺស្រដៀងគ្នាទៅនឹងលទ្ធផលដែលទទួលបានដោយ Kimbaris et al ។ 33 នៅលើ Culex ហ្វីលីពីន។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ សមាសធាតុទាំងពីរនេះមិនបានបង្ហាញពីសកម្មភាព autocidal ដ៏ល្អប្រឆាំងនឹងមូសគោលដៅនោះទេ ដែលវាស៊ីគ្នាជាមួយនឹងលទ្ធផលនៃ Plata-Rueda et al 34 នៅលើ Tenebrio molitor ។ Os EO មានប្រសិទ្ធភាពប្រឆាំងនឹងដំណាក់កាលដង្កូវរបស់ Aedes aegypti ប៉ុន្តែមិនមែនប្រឆាំងនឹងដំណាក់កាលពេញវ័យនោះទេ។ វាត្រូវបានបង្កើតឡើងថាសកម្មភាព larvicidal នៃសមាសធាតុបុគ្គលសំខាន់ៗគឺទាបជាង Os EO ឆៅ។ នេះបង្កប់ន័យតួនាទីសម្រាប់សមាសធាតុផ្សេងទៀត និងអន្តរកម្មរបស់វានៅក្នុងអុកស៊ីដអេទីឡែនឆៅ។ Methyl eugenol តែម្នាក់ឯងមានសកម្មភាពធ្វេសប្រហែស ចំណែក eugenol តែឯងមានសកម្មភាពសម្លាប់ដង្កូវមធ្យម។ ការសន្និដ្ឋាននេះបញ្ជាក់ថានៅលើដៃម្ខាង 35,36 និងនៅលើដៃផ្សេងទៀតផ្ទុយនឹងការសន្និដ្ឋានរបស់អ្នកស្រាវជ្រាវមុន37,38។ ភាពខុសគ្នានៃក្រុមមុខងារនៃ eugenol និង methyleugenol អាចបណ្តាលឱ្យមានការពុលផ្សេងៗគ្នាចំពោះសត្វល្អិតគោលដៅដូចគ្នា39។ Limonene ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានសកម្មភាព larvicidal កម្រិតមធ្យម ខណៈពេលដែលឥទ្ធិពលនៃ carvone គឺមិនសំខាន់។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ ការពុលតិចតួចនៃ limonene ចំពោះសត្វល្អិតពេញវ័យ និងការពុលខ្ពស់នៃ carvone គាំទ្រលទ្ធផលនៃការសិក្សាពីមុនមួយចំនួន 40 ប៉ុន្តែផ្ទុយពីអ្នកដទៃ 41 ។ វត្តមាននៃចំណងទ្វេរដងនៅទីតាំង intracyclic និង exocyclic អាចបង្កើនអត្ថប្រយោជន៍នៃសមាសធាតុទាំងនេះដូចជា larvicides3,41 ខណៈពេលដែល carvone ដែលជា ketone ជាមួយ unsaturated alpha និង beta carbons អាចបង្ហាញពីសក្តានុពលខ្ពស់សម្រាប់ការពុលចំពោះមនុស្សពេញវ័យ42។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយលក្ខណៈបុគ្គលនៃ limonene និង carvone គឺទាបជាង EO Mp សរុប (តារាងទី 1 តារាងទី 3) ។ ក្នុងចំណោមសារធាតុ terpenoids ដែលបានធ្វើតេស្ត eudesmol ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានសកម្មភាពសម្លាប់សត្វដង្កូវ និងមនុស្សពេញវ័យដ៏អស្ចារ្យបំផុតជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 ក្រោម 2.5 ppm ដែលធ្វើឱ្យវាក្លាយជាសមាសធាតុដ៏ជោគជ័យសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងមូស Aedes ។ ការអនុវត្តរបស់វាគឺប្រសើរជាង EO Em ទាំងមូល ទោះបីជាវាមិនស្របនឹងការរកឃើញរបស់ Cheng et al.40 ក៏ដោយ។ Eudesmol គឺជា sesquiterpene ដែលមានឯកតា isoprene ពីរដែលងាយនឹងបង្កជាហេតុតិចជាង monoterpenes ដែលមានអុកស៊ីហ្សែនដូចជា eucalyptus ហើយដូច្នេះវាមានសក្តានុពលខ្លាំងជាងជាថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិត។ Eucalyptol ខ្លួនវាមានមនុស្សពេញវ័យច្រើនជាងសកម្មភាព larvicidal ហើយលទ្ធផលពីការសិក្សាពីមុនទាំងការគាំទ្រនិងបដិសេធនេះ 37,43,44 ។ សកម្មភាពតែម្នាក់ឯងគឺស្ទើរតែប្រៀបធៀបទៅនឹង EO Cl ទាំងមូល។ monoterpene bicyclic មួយផ្សេងទៀត α-pinene មានឥទ្ធិពលតិចជាងមនុស្សពេញវ័យលើ Aedes aegypti ជាងឥទ្ធិពល larvicidal ដែលផ្ទុយពីឥទ្ធិពលនៃ EO Cl ពេញលេញ។ សកម្មភាពសម្លាប់សត្វល្អិតទាំងមូលនៃ terpenoids ត្រូវបានជះឥទ្ធិពលដោយ lipophilicity ភាពប្រែប្រួល សាខាកាបូន តំបន់ព្យាករណ៍ ផ្ទៃក្រឡា ក្រុមមុខងារ និងទីតាំងរបស់ពួកគេ 45,46 ។ សមាសធាតុទាំងនេះអាចធ្វើសកម្មភាពដោយការបំផ្លាញការប្រមូលផ្តុំកោសិកា រារាំងសកម្មភាពផ្លូវដង្ហើម រំខានដល់ការបញ្ជូនសរសៃប្រសាទ។ល។ សកម្មភាពមនុស្សពេញវ័យនៃ malathion organophosphorus សំយោគត្រូវបានគេរាយការណ៍នៅ 5.44 ppm ។ ទោះបីជា organophosphates ទាំងពីរនេះបានបង្ហាញពីការឆ្លើយតបដ៏អំណោយផលប្រឆាំងនឹងប្រភេទមន្ទីរពិសោធន៍នៃ Aedes aegypti ក៏ដោយ ក៏ភាពធន់នឹងមូសទៅនឹងសមាសធាតុទាំងនេះត្រូវបានគេរាយការណ៍នៅក្នុងផ្នែកផ្សេងៗនៃពិភពលោក49។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ មិនមានរបាយការណ៍ស្រដៀងគ្នានៃការវិវត្តនៃភាពធន់នឹងថ្នាំរុក្ខជាតិត្រូវបានគេរកឃើញ 50 ។ ដូច្នេះ រុក្ខសាស្ត្រត្រូវបានចាត់ទុកថាជាជម្រើសដ៏មានសក្តានុពលចំពោះថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតគីមីនៅក្នុងកម្មវិធីគ្រប់គ្រងវ៉ិចទ័រ។
ប្រសិទ្ធភាព larvicidal ត្រូវបានសាកល្បងលើ 28 បន្សំគោលពីរ (1: 1) ដែលរៀបចំពី terpenoids និង terpenoids ដ៏មានឥទ្ធិពលជាមួយ thymetphos ហើយ 9 បន្សំត្រូវបានរកឃើញថាជាសមរភូមិ 14 antagonistic និង 5 antagonistic ។ គ្មានផលប៉ះពាល់។ ម៉្យាងវិញទៀតនៅក្នុង bioassay សក្តានុពលសម្រាប់មនុស្សពេញវ័យ ការរួមផ្សំចំនួន 7 ត្រូវបានគេរកឃើញថាជាការរួមបញ្ចូលគ្នា 15 បន្សំគឺមានលក្ខណៈប្រឆាំង និង 6 បន្សំត្រូវបានគេរាយការណ៍ថាគ្មានប្រសិទ្ធភាព។ មូលហេតុដែលការផ្សំជាក់លាក់បង្កើតបាននូវឥទ្ធិពលរួមអាចបណ្តាលមកពីសមាសធាតុបេក្ខជនមានអន្តរកម្មក្នុងពេលដំណាលគ្នានៅក្នុងផ្លូវសំខាន់ៗផ្សេងៗគ្នា ឬការរារាំងជាបន្តបន្ទាប់នៃអង់ស៊ីមសំខាន់ៗផ្សេងៗគ្នានៃផ្លូវជីវសាស្ត្រជាក់លាក់ 51 ។ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ limonene ជាមួយ diallyl disulfide, eucalyptus ឬ eugenol ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នានៅក្នុងកម្មវិធីទាំងតូច និងធំ (តារាងទី 6) ខណៈពេលដែលការរួមផ្សំរបស់វាជាមួយ eucalyptus ឬ α-pinene ត្រូវបានរកឃើញថាមានឥទ្ធិពលប្រឆាំងលើដង្កូវ។ ជាមធ្យម limonene ហាក់ដូចជាអ្នករួមផ្សំដ៏ល្អ ប្រហែលជាដោយសារតែវត្តមានរបស់ក្រុមមេទីល ការជ្រៀតចូលដ៏ល្អទៅក្នុងស្រទាប់ stratum corneum និងយន្តការផ្សេងគ្នានៃសកម្មភាព52,53។ វាត្រូវបានគេរាយការណ៍ពីមុនថា limonene អាចបណ្តាលឱ្យមានផលប៉ះពាល់ពុលដោយការជ្រៀតចូល cuticles សត្វល្អិត (ការពុលទំនាក់ទំនង) ប៉ះពាល់ដល់ប្រព័ន្ធរំលាយអាហារ (ថ្នាំប្រឆាំងនឹងមេរោគ) ឬប៉ះពាល់ដល់ប្រព័ន្ធដកដង្ហើម (សកម្មភាពនៃការដុត) 54 ខណៈពេលដែល phenylpropanoids ដូចជា eugenol អាចប៉ះពាល់ដល់អង់ស៊ីមមេតាបូលីស 55 ។ Eucalyptol ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នាជាមួយ diallyl disulfide, eucalyptus ឬ α-pinene ប៉ុន្តែការរួមផ្សំផ្សេងទៀតជាមួយសមាសធាតុផ្សេងទៀតគឺមិនមែន larvicidal ឬ antagonistic ។ ការសិក្សាដំបូងបានបង្ហាញថា eucalyptol មានសកម្មភាពរារាំងលើ acetylcholinesterase (AChE) ក៏ដូចជា octaamine និង GABA receptors56 ។ ចាប់តាំងពី cyclic monoterpenes, eucalyptol, eugenol ជាដើមអាចមានយន្តការនៃសកម្មភាពដូចគ្នានឹងសកម្មភាព neurotoxic របស់ពួកគេ 57 ដោយហេតុនេះកាត់បន្ថយផលប៉ះពាល់រួមបញ្ចូលគ្នារបស់ពួកគេតាមរយៈការរារាំងគ្នាទៅវិញទៅមក។ ដូចគ្នានេះដែរ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ Temephos ជាមួយ diallyl disulfide, α-pinene និង limonene ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នា គាំទ្រដល់របាយការណ៍មុននៃឥទ្ធិពលរួមរវាងផលិតផលរុក្ខជាតិ និងសរីរាង្គសំយោគ 58 ។
ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ eudesmol និង eucalyptol ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានឥទ្ធិពលរួមលើដំណាក់កាលដង្កូវ និងដំណាក់កាលពេញវ័យរបស់ Aedes aegypti ដែលអាចធ្វើទៅបានដោយសារតែរបៀបនៃសកម្មភាពផ្សេងៗគ្នាដោយសារតែរចនាសម្ព័ន្ធគីមីផ្សេងៗគ្នារបស់ពួកគេ។ Eudesmol (a sesquiterpene) អាចប៉ះពាល់ដល់ប្រព័ន្ធដកដង្ហើម 59 ហើយ eucalyptol (a monoterpene) អាចប៉ះពាល់ដល់ acetylcholinesterase 60 ។ ការរួមផ្សំនៃធាតុផ្សំទៅកន្លែងគោលដៅពីរ ឬច្រើនអាចបង្កើនឥទ្ធិពលដ៍សាហាវនៃការរួមបញ្ចូលគ្នានេះ។ នៅក្នុង bioassays សារធាតុមនុស្សពេញវ័យ malathion ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នាជាមួយ carvone ឬ eucalyptol ឬ eucalyptol ឬ diallyl disulfide ឬ α-pinene ដែលបង្ហាញថាវាមានភាពស៊ីសង្វាក់គ្នាជាមួយនឹងការបន្ថែមនៃ limonene និង di ។ បេក្ខជនអាឡែស៊ីស៊ីសង្វាក់ល្អសម្រាប់ផលប័ត្រទាំងមូលនៃសមាសធាតុ terpene លើកលែងតែ allyl trisulfide ។ Thangam និង Kathiresan61 ក៏បានរាយការណ៍អំពីលទ្ធផលស្រដៀងគ្នានៃឥទ្ធិពលរួមនៃ malathion ជាមួយនឹងចំរាញ់ពីរុក្ខជាតិ។ ការឆ្លើយតបរួមនេះអាចបណ្តាលមកពីឥទ្ធិពលពុលរួមគ្នានៃ malathion និង phytochemicals លើអង់ស៊ីមបន្សាបជាតិពុលពីសត្វល្អិត។ Organophosphates ដូចជា malathion ជាទូទៅធ្វើសកម្មភាពដោយរារាំង cytochrome P450 esterases និង monooxygenases62,63,64 ។ ដូច្នេះ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ malathion ជាមួយនឹងយន្តការនៃសកម្មភាព និង terpenes ទាំងនេះជាមួយនឹងយន្តការនៃសកម្មភាពផ្សេងៗគ្នា អាចបង្កើនឥទ្ធិពលដ៍សាហាវលើសត្វមូស។
ម៉្យាងវិញទៀត ភាពប្រឆាំងបង្ហាញថាសមាសធាតុដែលបានជ្រើសរើសគឺមិនសូវសកម្មក្នុងការរួមបញ្ចូលគ្នាជាងសមាសធាតុនីមួយៗតែម្នាក់ឯង។ ហេតុផលសម្រាប់ការប្រឆាំងនៅក្នុងបន្សំមួយចំនួនអាចជាសមាសធាតុមួយកែប្រែឥរិយាបថនៃសមាសធាតុផ្សេងទៀតដោយការផ្លាស់ប្តូរអត្រានៃការស្រូបយក ការចែកចាយ ការរំលាយអាហារ ឬការបញ្ចេញចោល។ អ្នកស្រាវជ្រាវដំបូងបានចាត់ទុកថានេះជាមូលហេតុនៃការប្រឆាំងនៅក្នុងការផ្សំថ្នាំ។ យន្តការដែលអាចកើតមាននៃម៉ូលេគុល 65. ស្រដៀងគ្នានេះដែរ មូលហេតុដែលអាចកើតមាននៃការប្រឆាំងគ្នាអាចទាក់ទងនឹងយន្តការស្រដៀងគ្នានៃសកម្មភាព ការប្រកួតប្រជែងនៃសមាសធាតុផ្សំសម្រាប់កន្លែងទទួលដូចគ្នា ឬទីតាំងគោលដៅ។ ក្នុងករណីខ្លះ ការរារាំងមិនប្រកួតប្រជែងនៃប្រូតេអ៊ីនគោលដៅក៏អាចកើតមានផងដែរ។ នៅក្នុងការសិក្សានេះ សមាសធាតុ organosulfur ពីរគឺ diallyl disulfide និង diallyl trisulfide បានបង្ហាញពីឥទ្ធិពលប្រឆាំង ដែលអាចធ្វើទៅបានដោយសារតែការប្រកួតប្រជែងសម្រាប់ទីតាំងគោលដៅដូចគ្នា។ ដូចគ្នាដែរ សមាសធាតុស្ពាន់ធ័រទាំងពីរនេះបានបង្ហាញពីឥទ្ធិពលប្រឆាំង ហើយមិនមានផលប៉ះពាល់អ្វីឡើយនៅពេលផ្សំជាមួយ eudesmol និង α-pinene ។ Eudesmol និង alpha-pinene គឺជាវដ្តក្នុងធម្មជាតិ ចំណែក diallyl disulfide និង diallyl trisulfide គឺជា aliphatic ក្នុងធម្មជាតិ។ ដោយផ្អែកលើរចនាសម្ព័ន្ធគីមី ការរួមផ្សំនៃសមាសធាតុទាំងនេះគួរតែបង្កើនសកម្មភាពដ៍សាហាវរួម ចាប់តាំងពីទីតាំងគោលដៅរបស់ពួកគេជាធម្មតាខុសគ្នា 34,47 ប៉ុន្តែការពិសោធន៍យើងបានរកឃើញការប្រឆាំង ដែលប្រហែលជាដោយសារតួនាទីនៃសមាសធាតុទាំងនេះនៅក្នុងសារពាង្គកាយមិនស្គាល់មួយចំនួននៅក្នុង vivo ។ ប្រព័ន្ធដែលជាលទ្ធផលនៃអន្តរកម្ម។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃ cineole និង α-pinene បានបង្កើតការឆ្លើយតបប្រឆាំង ទោះបីជាអ្នកស្រាវជ្រាវបានរាយការណ៍ពីមុនថា សមាសធាតុទាំងពីរមានគោលដៅផ្សេងគ្នានៃសកម្មភាព 47,60 ក៏ដោយ។ ដោយសារសមាសធាតុទាំងពីរជា cyclic monoterpenes វាអាចមានទីតាំងគោលដៅទូទៅមួយចំនួនដែលអាចប្រកួតប្រជែងសម្រាប់ការចង និងមានឥទ្ធិពលលើការពុលទាំងមូលនៃគូផ្សំដែលបានសិក្សា។
ដោយផ្អែកលើតម្លៃ LC50 និងអត្រាមរណភាពដែលបានសង្កេតឃើញ ការរួមផ្សំ terpene សំយោគដ៏ល្អបំផុតពីរត្រូវបានជ្រើសរើសគឺគូនៃ carvone + limonene និង eucalyptol + eudesmol ក៏ដូចជា organophosphorus malathion សំយោគជាមួយ terpenes ។ ការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏ល្អប្រសើរនៃសមាសធាតុ malathion + Eudesmol ត្រូវបានសាកល្បងនៅក្នុង bioassay ថ្នាំសំលាប់សត្វល្អិតមនុស្សពេញវ័យ។ កំណត់គោលដៅអាណានិគមសត្វល្អិតធំៗ ដើម្បីបញ្ជាក់ថាតើការរួមផ្សំដ៏មានប្រសិទ្ធភាពទាំងនេះអាចធ្វើការប្រឆាំងនឹងបុគ្គលមួយចំនួនធំលើកន្លែងដែលមានការប៉ះពាល់ធំឬអត់។ ការរួមផ្សំទាំងអស់នេះបង្ហាញពីឥទ្ធិពលរួមប្រឆាំងនឹងហ្វូងសត្វល្អិតដ៏ធំ។ លទ្ធផលស្រដៀងគ្នានេះត្រូវបានគេទទួលបានសម្រាប់ការរួមផ្សំនៃដង្កូវស៊ីស៊ីស៊ីស៊ីគ្នាដ៏ល្អប្រសើរដែលត្រូវបានសាកល្បងប្រឆាំងនឹងចំនួនដ៏ធំនៃដង្កូវ Aedes aegypti ។ ដូច្នេះ គេអាចនិយាយបានថា ការរួមផ្សំគ្នារវាងដង្កូវនាង និងការសម្លាប់មនុស្សពេញវ័យនៃសមាសធាតុ EO របស់រុក្ខជាតិគឺជាបេក្ខជនដ៏រឹងមាំប្រឆាំងនឹងសារធាតុគីមីសំយោគដែលមានស្រាប់ ហើយអាចត្រូវបានប្រើបន្ថែមទៀតដើម្បីគ្រប់គ្រងចំនួនប្រជាជន Aedes aegypti ។ ដូចគ្នានេះដែរ ការរួមផ្សំដ៏មានប្រសិទ្ធភាពនៃថ្នាំសម្លាប់ដង្កូវសំយោគ ឬថ្នាំសម្លាប់មនុស្សពេញវ័យជាមួយថ្នាំ terpenes ក៏អាចត្រូវបានប្រើដើម្បីកាត់បន្ថយកម្រិតថ្នាំ thymetphos ឬ malathion ដែលគ្រប់គ្រងលើមូស។ ការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏មានឥទ្ធិពលទាំងនេះអាចផ្តល់នូវដំណោះស្រាយសម្រាប់ការសិក្សានាពេលអនាគតលើការវិវត្តនៃភាពធន់នឹងថ្នាំនៅក្នុងមូស Aedes ។
ស៊ុតរបស់ Aedes aegypti ត្រូវបានប្រមូលពីមជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវវេជ្ជសាស្ត្រក្នុងតំបន់ Dibrugarh ក្រុមប្រឹក្សាស្រាវជ្រាវវេជ្ជសាស្ត្រឥណ្ឌា និងរក្សាទុកនៅក្រោមសីតុណ្ហភាពគ្រប់គ្រង (28 ± 1 °C) និងសំណើម (85 ± 5%) នៅក្នុងនាយកដ្ឋានសត្វវិទ្យា សាកលវិទ្យាល័យ Gauhati ក្រោមលក្ខខណ្ឌដូចខាងក្រោម: Arivoli ត្រូវបានពិពណ៌នា et al ។ បន្ទាប់ពីញាស់ កូនដង្កូវត្រូវបានផ្តល់អាហារដល់ដង្កូវនាង (ម្សៅប៊ីស្គីស និងមេដំបែក្នុងសមាមាត្រ 3:1) ហើយមនុស្សពេញវ័យត្រូវបានផ្តល់អាហារដល់ដំណោះស្រាយគ្លុយកូស 10%។ ចាប់ផ្តើមនៅថ្ងៃទី 3 បន្ទាប់ពីការលេចឡើង មូសញីពេញវ័យត្រូវបានអនុញ្ញាតឱ្យបឺតឈាមរបស់កណ្តុរអាល់ប៊ីណូ។ ត្រាំក្រដាសចម្រោះក្នុងទឹកក្នុងកែវ ហើយដាក់ក្នុងទ្រុងពង។
សំណាករុក្ខជាតិដែលបានជ្រើសរើសគឺស្លឹក eucalyptus (Myrtaceae), basil បរិសុទ្ធ (Lamiaceae), mint (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) និងអំពូល allium (Amaryllidaceae) ។ ប្រមូលពី Guwahati និងកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយនាយកដ្ឋាន Botany សាកលវិទ្យាល័យ Gauhati ។ សំណាករុក្ខជាតិដែលប្រមូលបាន (500 ក្រាម) ត្រូវបានទទួលរងនូវការជ្រលក់ទឹកដោយប្រើឧបករណ៍ Clevenger រយៈពេល 6 ម៉ោង។ EO ចម្រាញ់ត្រូវបានប្រមូលក្នុងដបកែវស្អាត ហើយរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4°C សម្រាប់ការសិក្សាបន្ថែម។
ការពុលលើដង្កូវនាងត្រូវបានសិក្សាដោយប្រើនីតិវិធីស្តង់ដាររបស់អង្គការសុខភាពពិភពលោកដែលបានកែប្រែបន្តិចបន្តួច 67 ។ ប្រើ DMSO ជាសារធាតុ emulsifier ។ ការផ្តោតអារម្មណ៍ EO នីមួយៗត្រូវបានធ្វើតេស្តដំបូងនៅកម្រិត 100 និង 1000 ppm ដោយបង្ហាញដង្កូវចំនួន 20 នៅក្នុងការចម្លងនីមួយៗ។ ដោយផ្អែកលើលទ្ធផល កម្រិតកំហាប់មួយត្រូវបានអនុវត្ត ហើយអត្រាមរណភាពត្រូវបានកត់ត្រាពី 1 ម៉ោងទៅ 6 ម៉ោង (នៅចន្លោះពេល 1 ម៉ោង) និងនៅ 24 ម៉ោង 48 ម៉ោង និង 72 ម៉ោងបន្ទាប់ពីការព្យាបាល។ កំហាប់ Sublethal (LC50) ត្រូវបានកំណត់បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់ 24, 48 និង 72 ម៉ោង។ ការផ្តោតអារម្មណ៍នីមួយៗត្រូវបានវិភាគជាបីដង រួមជាមួយនឹងការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមានមួយ (ទឹកតែប៉ុណ្ណោះ) និងការគ្រប់គ្រងវិជ្ជមានមួយ (ទឹកដែលព្យាបាលដោយ DMSO)។ ប្រសិនបើ pupation កើតឡើង ហើយច្រើនជាង 10% នៃ larvae នៃក្រុមត្រួតពិនិត្យស្លាប់ ការពិសោធន៍ត្រូវបានធ្វើម្តងទៀត។ ប្រសិនបើអត្រាមរណៈនៅក្នុងក្រុមត្រួតពិនិត្យគឺស្ថិតនៅចន្លោះពី 5-10% សូមប្រើរូបមន្តកែតម្រូវ Abbott 68 ។
វិធីសាស្រ្តពិពណ៌នាដោយ Ramar et al ។ 69 ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ជីវវិទ្យាមនុស្សពេញវ័យប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ដោយប្រើអាសេតូនជាសារធាតុរំលាយ។ EO នីមួយៗត្រូវបានធ្វើតេស្តដំបូងប្រឆាំងនឹងមូស Aedes aegypti មនុស្សពេញវ័យនៅកំហាប់ 100 និង 1000 ppm ។ លាប 2 មីលីលីត្រនៃដំណោះស្រាយដែលបានរៀបចំនីមួយៗទៅលេខ Whatman ។ ក្រដាសតម្រង 1 ដុំ (ទំហំ 12 x 15 cm2) ហើយទុកឱ្យអាសេតូនហួតរយៈពេល 10 នាទី។ ក្រដាសតម្រងដែលត្រូវបានព្យាបាលដោយអាសេតូនតែ 2 មីលីលីត្រប៉ុណ្ណោះត្រូវបានគេប្រើជាវត្ថុបញ្ជា។ បន្ទាប់ពីអាសេតូនបានហួតរួច ក្រដាសចម្រោះដែលបានព្យាបាល និងក្រដាសតម្រងត្រួតពិនិត្យត្រូវបានដាក់ក្នុងបំពង់រាងស៊ីឡាំង (ជម្រៅ 10 សង់ទីម៉ែត្រ)។ មូសដែលមិនផ្តល់ឈាមអាយុពី 3 ទៅ 4 ថ្ងៃ ចំនួន 10 ត្រូវបានផ្ទេរទៅជាបីដងនៃកំហាប់នីមួយៗ។ ដោយផ្អែកលើលទ្ធផលនៃការធ្វើតេស្តបឋម កំហាប់ផ្សេងៗនៃប្រេងដែលបានជ្រើសរើសត្រូវបានធ្វើតេស្ត។ ការស្លាប់ត្រូវបានកត់ត្រានៅម៉ោង 1 ម៉ោង 2 ម៉ោង 3 ម៉ោង 4 ម៉ោង 5 ម៉ោង 6 ម៉ោង 24 ម៉ោង 48 ម៉ោង និង 72 ម៉ោងបន្ទាប់ពីការបញ្ចេញមូស។ គណនាតម្លៃ LC50 សម្រាប់ពេលវេលានៃការប៉ះពាល់ 24 ម៉ោង 48 ម៉ោង និង 72 ម៉ោង។ ប្រសិនបើអត្រាមរណៈនៃការត្រួតត្រាលើសពី 20% ធ្វើការធ្វើតេស្តទាំងមូលម្តងទៀត។ ដូចគ្នានេះដែរ ប្រសិនបើអត្រាមរណៈនៅក្នុងក្រុមត្រួតពិនិត្យគឺធំជាង 5% កែតម្រូវលទ្ធផលសម្រាប់សំណាកដែលបានព្យាបាលដោយប្រើរូបមន្ត 68 របស់ Abbott ។
Gas chromatography (Agilent 7890A) និង Mass spectrometry (Accu TOF GCv, Jeol) ត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីវិភាគសមាសធាតុផ្សំនៃប្រេងសំខាន់ៗដែលបានជ្រើសរើស។ GC ត្រូវបានបំពាក់ដោយឧបករណ៍ចាប់ FID និងជួរឈរ capillary (HP5-MS) ។ ឧស្ម័នក្រុមហ៊ុនអាកាសចរណ៍គឺ អេលីយ៉ូម អត្រាលំហូរគឺ 1 មីលីលីត្រ / នាទី។ កម្មវិធី GC កំណត់ Allium sativum ទៅ 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M និង Ocimum Sainttum ទៅ 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 សម្រាប់ mint 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280 សម្រាប់ eucalyptus 20.60-1M-10-200-3M-30-280 និងសម្រាប់ពណ៌ក្រហមសម្រាប់ស្រទាប់មួយពាន់គឺពួកគេ 10:60-1M-8-220-5M
សមាសធាតុសំខាន់ៗនៃ EO នីមួយៗត្រូវបានគេកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយផ្អែកលើភាគរយនៃផ្ទៃដែលបានគណនាពី GC chromatogram និងលទ្ធផល spectrometry ដ៏ធំ (យោងទៅមូលដ្ឋានទិន្នន័យស្តង់ដារ NIST 70) ។
សមាសធាតុសំខាន់ៗចំនួនពីរនៅក្នុង EO នីមួយៗត្រូវបានជ្រើសរើសដោយផ្អែកលើលទ្ធផល GC-MS និងបានទិញពី Sigma-Aldrich នៅភាពបរិសុទ្ធ 98-99% សម្រាប់ bioassays បន្ថែមទៀត។ សមាសធាតុនេះត្រូវបានធ្វើតេស្តសម្រាប់ប្រសិទ្ធភាពនៃការសម្លាប់ដង្កូវ និងមនុស្សពេញវ័យប្រឆាំងនឹង Aedes aegypti ដូចដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ។ ថ្នាំសំលាប់ដង្កូវសំយោគដែលប្រើជាទូទៅបំផុត tamephosate (Sigma Aldrich) និងថ្នាំមនុស្សពេញវ័យ malathion (Sigma Aldrich) ត្រូវបានវិភាគដើម្បីប្រៀបធៀបប្រសិទ្ធភាពរបស់ពួកគេជាមួយនឹងសមាសធាតុ EO ដែលបានជ្រើសរើសដោយអនុវត្តតាមនីតិវិធីដូចគ្នា។
ល្បាយគោលពីរនៃសមាសធាតុ terpene ដែលបានជ្រើសរើស និងសមាសធាតុ terpene បូកនឹង organophosphates ពាណិជ្ជកម្ម (tilephos និង malathion) ត្រូវបានរៀបចំដោយលាយកម្រិត LC50 នៃសមាសធាតុបេក្ខជននីមួយៗក្នុងសមាមាត្រ 1: 1 ។ ការផ្សំដែលបានរៀបចំត្រូវបានធ្វើតេស្តលើដំណាក់កាលដង្កូវ និងមនុស្សពេញវ័យនៃ Aedes aegypti ដូចដែលបានរៀបរាប់ខាងលើ។ bioassay នីមួយៗត្រូវបានអនុវត្តជា triplicate សម្រាប់បន្សំនីមួយៗ និង triplicate សម្រាប់សមាសធាតុនីមួយៗដែលមានវត្តមាននៅក្នុងបន្សំនីមួយៗ។ ការស្លាប់របស់សត្វល្អិតគោលដៅត្រូវបានកត់ត្រាបន្ទាប់ពី 24 ម៉ោង។ គណនាអត្រាមរណៈដែលរំពឹងទុកសម្រាប់ល្បាយគោលពីរដោយប្រើរូបមន្តខាងក្រោម។
ដែល E = អត្រាមរណៈដែលរំពឹងទុកនៃមូស Aedes aegypti ក្នុងការឆ្លើយតបទៅនឹងការរួមផ្សំប្រព័ន្ធគោលពីរ ពោលគឺការតភ្ជាប់ (A + B)។
ឥទ្ធិពលនៃល្បាយគោលពីរនីមួយៗត្រូវបានដាក់ស្លាកថាជាសមរភូមិ ប្រឆាំង ឬគ្មានឥទ្ធិពលដោយផ្អែកលើតម្លៃ χ2 ដែលគណនាដោយវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាដោយ Pavla52 ។ គណនាតម្លៃ χ2 សម្រាប់បន្សំនីមួយៗដោយប្រើរូបមន្តខាងក្រោម។
ឥទ្ធិពលនៃការរួមបញ្ចូលគ្នាត្រូវបានកំណត់ថាជាការរួមបញ្ចូលគ្នានៅពេលដែលតម្លៃ χ2 ដែលបានគណនាគឺធំជាងតម្លៃតារាងសម្រាប់ដឺក្រេនៃសេរីភាពដែលត្រូវគ្នា (ចន្លោះពេលទំនុកចិត្ត 95%) ហើយប្រសិនបើការស្លាប់ដែលបានអង្កេតត្រូវបានរកឃើញថាលើសពីអត្រាមរណៈដែលរំពឹងទុក។ ដូចគ្នានេះដែរ ប្រសិនបើតម្លៃ χ2 ដែលបានគណនាសម្រាប់បន្សំណាមួយលើសពីតម្លៃតារាងជាមួយនឹងកម្រិតនៃសេរីភាពមួយចំនួន ប៉ុន្តែអត្រាមរណៈដែលបានសង្កេតគឺទាបជាងអត្រាមរណៈដែលរំពឹងទុកនោះ ការព្យាបាលត្រូវបានចាត់ទុកថាជាសត្រូវ។ ហើយប្រសិនបើនៅក្នុងបន្សំណាមួយ តម្លៃដែលបានគណនានៃ χ2 គឺតិចជាងតម្លៃតារាងក្នុងកម្រិតនៃសេរីភាពដែលត្រូវគ្នានោះ ការរួមបញ្ចូលគ្នានេះត្រូវបានគេចាត់ទុកថាគ្មានប្រសិទ្ធភាព។
ការរួមផ្សំគ្នាដែលមានសក្តានុពលពី 3 ទៅ 4 (ដង្កូវ 100 និង 50 ដង្កូវស៊ី និងសកម្មភាពសត្វល្អិតពេញវ័យ) ត្រូវបានជ្រើសរើសសម្រាប់ការធ្វើតេស្តប្រឆាំងនឹងសត្វល្អិតមួយចំនួនធំ។ មនុស្សពេញវ័យ) បន្តដូចខាងលើ។ រួមជាមួយនឹងល្បាយ សមាសធាតុនីមួយៗដែលមាននៅក្នុងល្បាយដែលបានជ្រើសរើសក៏ត្រូវបានធ្វើតេស្តលើចំនួនស្មើគ្នានៃដង្កូវ Aedes aegypti និងមនុស្សពេញវ័យផងដែរ។ សមាមាត្ររួមបញ្ចូលគ្នាគឺជាផ្នែកមួយដូស LC50 នៃសមាសធាតុបេក្ខជនមួយ និងផ្នែក LC50 នៃសមាសធាតុផ្សំផ្សេងទៀត។ នៅក្នុង bioassay សកម្មភាពមនុស្សពេញវ័យ សមាសធាតុដែលបានជ្រើសរើសត្រូវបានរំលាយនៅក្នុងសារធាតុរំលាយអាសេតូន ហើយបានអនុវត្តទៅក្រដាសតម្រងដែលរុំក្នុងធុងប្លាស្ទិករាងស៊ីឡាំងទំហំ 1300 សង់ទីម៉ែត្រ។ អាសេតូនត្រូវបានហួតអស់រយៈពេល 10 នាទីហើយមនុស្សពេញវ័យត្រូវបានបញ្ចេញ។ ស្រដៀងគ្នានេះដែរ នៅក្នុងជីវគីមីសម្លាប់ដង្កូវ ដូសនៃសមាសធាតុបេក្ខជន LC50 ត្រូវបានរំលាយដំបូងក្នុងបរិមាណស្មើគ្នានៃ DMSO ហើយបន្ទាប់មកលាយជាមួយទឹក 1 លីត្រដែលរក្សាទុកក្នុងធុងប្លាស្ទិក 1300 cc ហើយដង្កូវត្រូវបានបញ្ចេញ។
ការវិភាគប្រូបាប៊ីលីតេនៃទិន្នន័យមរណភាពដែលបានកត់ត្រាចំនួន 71 ត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើកម្មវិធី SPSS (កំណែ 16) និងកម្មវិធី Minitab ដើម្បីគណនាតម្លៃ LC50 ។
ពេលវេលាផ្សាយ៖ កក្កដា-០១-២០២៤