ឲ្យមានប្រសិទ្ធភាពគ្រប់គ្រងមូសនិងកាត់បន្ថយអត្រាកើតជំងឺដែលពួកវាផ្ទុក ជម្រើសជាយុទ្ធសាស្ត្រ ប្រកបដោយចីរភាព និងមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថានចំពោះថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតគីមីគឺត្រូវការជាចាំបាច់។ យើងបានវាយតម្លៃម្សៅគ្រាប់ពូជពីរុក្ខជាតិ Brassicaceae មួយចំនួន (គ្រួសារ Brassica) ជាប្រភពនៃអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតដែលមានប្រភពមកពីរុក្ខជាតិដែលផលិតដោយការរំលាយអង់ស៊ីមនៃគ្លូកូស៊ីណូឡាតអសកម្មជីវសាស្រ្តសម្រាប់ប្រើប្រាស់ក្នុងការគ្រប់គ្រងសត្វមូស Aedes អេហ្ស៊ីប (L., 1762)។ ម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ប្រាំប្រភេទ (Brassica juncea (L) Czern., 1859, Lepidium sativum L., 1753, Sinapis alba L., 1753, Thlaspi arvense L., 1753 និង Thlaspi arvense – ប្រភេទសំខាន់ៗបីនៃការធ្វើឱ្យអសកម្មដោយកម្ដៅ និងការរិចរិលអង់ស៊ីម ផលិតផលគីមី ដើម្បីកំណត់ជាតិពុល (LC50) នៃ allyl isothiocyanate, benzyl isothiocyanate និង 4-hydroxybenzylisothiocyanate ចំពោះដង្កូវ Aedes aegypti នៅពេលប៉ះពាល់ 24 ម៉ោង = 0.04 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O)។ តម្លៃ LC50 សម្រាប់ mustard, mustard ពណ៌ស និង horsetail។ ម្សៅគ្រាប់ពូជមានកម្រិត 0.05, 0.08 និង 0.05 រៀងគ្នាបើប្រៀបធៀបទៅនឹង allyl isothiocyanate (LC50 = 19.35 ppm) និង 4. -Hydroxybenzylisothiocyanate (LC50 = 55.41 ppm) មានជាតិពុលច្រើនជាងចំពោះដង្កូវក្នុងរយៈពេល 24 ម៉ោងបន្ទាប់ពីការព្យាបាលជាង 0.1 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O រៀងៗខ្លួន។ លទ្ធផលទាំងនេះស្របនឹងការផលិតម្សៅគ្រាប់ពូជ alfalfa។ ប្រសិទ្ធភាពខ្ពស់នៃអេស្ទ័រ benzyl ត្រូវគ្នាទៅនឹងតម្លៃ LC50 ដែលបានគណនា។ ការប្រើប្រាស់ម្សៅគ្រាប់ពូជអាចផ្តល់នូវវិធីសាស្រ្តដ៏មានប្រសិទ្ធភាពនៃការគ្រប់គ្រងមូស។ ប្រសិទ្ធភាពនៃម្សៅគ្រាប់ពូជ cruciferous និងសមាសធាតុគីមីសំខាន់ៗរបស់វាប្រឆាំងនឹងដង្កូវមូស និងបង្ហាញពីរបៀបដែលសមាសធាតុធម្មជាតិនៅក្នុងម្សៅគ្រាប់ពូជ cruciferous អាចបម្រើជាថ្នាំសម្លាប់ដង្កូវដែលមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថានសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងមូស។
ជំងឺដែលឆ្លងតាមវ៉ិចទ័រដែលបង្កឡើងដោយមូស Aedes នៅតែជាបញ្ហាសុខភាពសាធារណៈដ៏សំខាន់មួយរបស់ពិភពលោក។ អត្រានៃជំងឺដែលឆ្លងតាមមូសរាលដាលតាមភូមិសាស្ត្រ1,2,3 ហើយកើតឡើងវិញ ដែលនាំឱ្យមានការផ្ទុះឡើងនៃជំងឺធ្ងន់ធ្ងរ4,5,6,7។ ការរីករាលដាលនៃជំងឺក្នុងចំណោមមនុស្ស និងសត្វ (ឧទាហរណ៍ ឈីគុនហ្គុនយ៉ា ជំងឺគ្រុនឈាម ជំងឺគ្រុនផ្តាសាយ គ្រុនលឿង និងវីរុស Zika) គឺមិនធ្លាប់មានពីមុនមក។ ជំងឺគ្រុនឈាមតែមួយមុខធ្វើឱ្យមនុស្សប្រហែល 3.6 ពាន់លាននាក់ប្រឈមនឹងហានិភ័យនៃការឆ្លងមេរោគនៅតំបន់ត្រូពិច ដោយមានការឆ្លងប្រហែល 390 លាននាក់កើតឡើងជារៀងរាល់ឆ្នាំ ដែលបណ្តាលឱ្យមានមនុស្សស្លាប់ពី 6,100 ទៅ 24,300 នាក់ក្នុងមួយឆ្នាំ8។ ការលេចឡើង និងការផ្ទុះឡើងនៃវីរុស Zika នៅអាមេរិកខាងត្បូងបានទាក់ទាញការចាប់អារម្មណ៍ទូទាំងពិភពលោកដោយសារតែការខូចខាតខួរក្បាលដែលវាបណ្តាលឱ្យមានចំពោះកុមារដែលកើតចេញពីស្ត្រីដែលឆ្លងមេរោគ2។ Kremer et al 3 ព្យាករណ៍ថាជួរភូមិសាស្ត្រនៃមូស Aedes នឹងបន្តពង្រីក ហើយនៅឆ្នាំ 2050 ពាក់កណ្តាលនៃចំនួនប្រជាជនពិភពលោកនឹងប្រឈមនឹងហានិភ័យនៃការឆ្លងមេរោគដោយមេរោគ arbovirus ដែលឆ្លងតាមមូស។
លើកលែងតែវ៉ាក់សាំងប្រឆាំងនឹងជំងឺគ្រុនឈាម និងគ្រុនលឿងដែលទើបបង្កើតថ្មីៗ វ៉ាក់សាំងប្រឆាំងនឹងជំងឺដែលឆ្លងតាមមូសភាគច្រើនមិនទាន់ត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅឡើយទេ9,10,11។ វ៉ាក់សាំងនៅតែមានក្នុងបរិមាណមានកំណត់ ហើយត្រូវបានប្រើប្រាស់តែក្នុងការសាកល្បងព្យាបាលប៉ុណ្ណោះ។ ការគ្រប់គ្រងវ៉ិចទ័រមូសដោយប្រើថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសំយោគ គឺជាយុទ្ធសាស្ត្រសំខាន់មួយដើម្បីគ្រប់គ្រងការរីករាលដាលនៃជំងឺដែលឆ្លងតាមមូស12,13។ ទោះបីជាថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសំយោគមានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការសម្លាប់មូសក៏ដោយ ការបន្តប្រើប្រាស់ថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសំយោគប៉ះពាល់អវិជ្ជមានដល់សារពាង្គកាយដែលមិនមែនជាគោលដៅ និងបំពុលបរិស្ថាន14,15,16។ អ្វីដែលគួរឱ្យព្រួយបារម្ភជាងនេះទៅទៀតនោះគឺនិន្នាការនៃការកើនឡើងនៃភាពធន់នឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតគីមី17,18,19។ បញ្ហាទាំងនេះដែលទាក់ទងនឹងថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតបានពន្លឿនការស្វែងរកជម្រើសដែលមានប្រសិទ្ធភាព និងមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថានដើម្បីគ្រប់គ្រងវ៉ិចទ័រជំងឺ។
រុក្ខជាតិជាច្រើនប្រភេទត្រូវបានបង្កើតឡើងជាប្រភពនៃថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងសត្វល្អិត20,21។ សារធាតុរុក្ខជាតិជាទូទៅមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថានទេ ពីព្រោះវាងាយរលួយ និងមានជាតិពុលទាប ឬមិនសំខាន់ចំពោះសារពាង្គកាយដែលមិនមែនជាគោលដៅដូចជាថនិកសត្វ ត្រី និងសត្វអំពិលអំពែក20,22។ ការរៀបចំរុក្ខជាតិត្រូវបានគេដឹងថាផលិតសមាសធាតុជីវសកម្មជាច្រើនប្រភេទជាមួយនឹងយន្តការសកម្មភាពផ្សេងៗគ្នាដើម្បីគ្រប់គ្រងដំណាក់កាលជីវិតផ្សេងៗគ្នារបស់មូសប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព23,24,25,26។ សមាសធាតុដែលមានប្រភពមកពីរុក្ខជាតិដូចជាប្រេងសំខាន់ៗ និងគ្រឿងផ្សំសកម្មផ្សេងទៀតរបស់រុក្ខជាតិបានទទួលការចាប់អារម្មណ៍ និងបានបើកផ្លូវសម្រាប់ឧបករណ៍ច្នៃប្រឌិតដើម្បីគ្រប់គ្រងវ៉ិចទ័រមូស។ ប្រេងសំខាន់ៗ ម៉ូណូទែរភីន និងសេស្គីទែរភីនដើរតួជាថ្នាំបណ្តេញមូស ថ្នាំរារាំងការស៊ីចំណី និងថ្នាំសម្លាប់មូស27,28,29,30,31,32,33។ ប្រេងបន្លែជាច្រើនបណ្តាលឱ្យដង្កូវមូស ដង្កូវ និងសត្វមូសពេញវ័យស្លាប់34,35,36 ដែលប៉ះពាល់ដល់ប្រព័ន្ធសរសៃប្រសាទ ផ្លូវដង្ហើម អង់ដូគ្រីន និងប្រព័ន្ធសំខាន់ៗផ្សេងទៀតរបស់សត្វល្អិត37។
ការសិក្សាថ្មីៗបានផ្តល់នូវការយល់ដឹងអំពីការប្រើប្រាស់សក្តានុពលនៃរុក្ខជាតិស្ពៃខ្មៅ និងគ្រាប់ពូជរបស់វាជាប្រភពនៃសមាសធាតុជីវសកម្ម។ ម្សៅគ្រាប់ស្ពៃខ្មៅត្រូវបានសាកល្បងជាសារធាតុជីវសាស្រ្ដ38,39,40,41 និងត្រូវបានប្រើជាសារធាតុកែប្រែដីសម្រាប់ការបង្ក្រាបស្មៅ42,43,44 និងការគ្រប់គ្រងភ្នាក់ងារបង្កជំងឺរុក្ខជាតិដែលកើតក្នុងដី45,46,47,48,49,50, អាហារូបត្ថម្ភរុក្ខជាតិ។ ណេម៉ាតូត41,51, 52, 53, 54 និងសត្វល្អិត55, 56, 57, 58, 59, 60។ សកម្មភាពសម្លាប់ផ្សិតនៃម្សៅគ្រាប់ពូជទាំងនេះត្រូវបានសន្មតថាជាសមាសធាតុការពាររុក្ខជាតិដែលហៅថា isothiocyanates38,42,60។ នៅក្នុងរុក្ខជាតិ សមាសធាតុការពារទាំងនេះត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងកោសិការុក្ខជាតិក្នុងទម្រង់ជា glucosinolates ដែលមិនមានជីវសកម្ម។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ នៅពេលដែលរុក្ខជាតិត្រូវបានខូចខាតដោយការស៊ីសត្វល្អិត ឬការឆ្លងមេរោគភ្នាក់ងារបង្កជំងឺ glucosinolates ត្រូវបាន hydrolyzed ដោយ myrosinase ទៅជា isothiocyanates ជីវសកម្ម55,61។ អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត គឺជាសមាសធាតុងាយនឹងបង្កជាឧស្ម័ន ដែលគេដឹងថាមានសកម្មភាពប្រឆាំងមេរោគ និងសម្លាប់សត្វល្អិតយ៉ាងទូលំទូលាយ ហើយរចនាសម្ព័ន្ធ សកម្មភាពជីវសាស្រ្ត និងមាតិការបស់វាមានភាពខុសគ្នាយ៉ាងខ្លាំងក្នុងចំណោមប្រភេទ Brassicaceae42,59,62,63។
ទោះបីជាអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតដែលទទួលបានពីម្សៅគ្រាប់ស្ពៃខ្មៅត្រូវបានគេដឹងថាមានសកម្មភាពសម្លាប់សត្វល្អិតក៏ដោយ ទិន្នន័យស្តីពីសកម្មភាពជីវសាស្រ្តប្រឆាំងនឹងវ៉ិចទ័រអាត្រូប៉ូដដែលមានសារៈសំខាន់ខាងវេជ្ជសាស្ត្រនៅខ្វះខាត។ ការសិក្សារបស់យើងបានពិនិត្យមើលសកម្មភាពសម្លាប់ដង្កូវនៃម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ចំនួនបួនប្រឆាំងនឹងមូស Aedes ។ ដង្កូវរបស់ Aedes aegypti ។ គោលបំណងនៃការសិក្សានេះគឺដើម្បីវាយតម្លៃការប្រើប្រាស់សក្តានុពលរបស់ពួកវាជាថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតជីវសាស្រ្តដែលមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថានសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងមូស។ សមាសធាតុគីមីសំខាន់ៗចំនួនបីនៃម្សៅគ្រាប់ពូជគឺ allyl isothiocyanate (AITC) benzyl isothiocyanate (BITC) និង 4-hydroxybenzylisothiocyanate (4-HBITC) ក៏ត្រូវបានសាកល្បងដើម្បីសាកល្បងសកម្មភាពជីវសាស្រ្តនៃសមាសធាតុគីមីទាំងនេះលើដង្កូវមូស។ នេះគឺជារបាយការណ៍ដំបូងដើម្បីវាយតម្លៃប្រសិទ្ធភាពនៃម្សៅគ្រាប់ពូជស្ពៃក្តោបចំនួនបួន និងសមាសធាតុគីមីសំខាន់ៗរបស់វាប្រឆាំងនឹងដង្កូវមូស។
អាណានិគមមន្ទីរពិសោធន៍របស់ Aedes aegypti (ពូជ Rockefeller) ត្រូវបានរក្សានៅសីតុណ្ហភាព 26°C សំណើមដែលទាក់ទង 70% (RH) និងរយៈពេល 10:14 ម៉ោង (រយៈពេលពន្លឺ L:D)។ ញីដែលផ្គូផ្គងត្រូវបានដាក់ក្នុងទ្រុងប្លាស្ទិក (កម្ពស់ 11 សង់ទីម៉ែត្រ និងអង្កត់ផ្ចិត 9.5 សង់ទីម៉ែត្រ) ហើយត្រូវបានផ្តល់ចំណីតាមរយៈប្រព័ន្ធផ្តល់ចំណីដោយដបដោយប្រើឈាមគោ citrated (HemoStat Laboratories Inc., Dixon, CA, USA)។ ការផ្តល់ចំណីឈាមត្រូវបានអនុវត្តដូចធម្មតាដោយប្រើឧបករណ៍ផ្តល់ចំណីកញ្ចក់ច្រើនស្រទាប់ (Chemglass, Life Sciences LLC, Vineland, NJ, USA) ដែលភ្ជាប់ទៅនឹងបំពង់អាងងូតទឹកដែលមានចរន្តឈាម (HAAKE S7, Thermo-Scientific, Waltham, MA, USA) ជាមួយនឹងការគ្រប់គ្រងសីតុណ្ហភាព 37°C។ លាតខ្សែភាពយន្ត Parafilm M ទៅលើបាតបន្ទប់ផ្តល់ចំណីកញ្ចក់នីមួយៗ (ផ្ទៃ 154 mm2)។ បន្ទាប់មកឧបករណ៍ផ្តល់ចំណីនីមួយៗត្រូវបានដាក់នៅលើក្រឡាចត្រង្គខាងលើដែលគ្របដណ្ដប់លើទ្រុងដែលមានញីផ្គូផ្គង។ ឈាមគោប្រហែល 350–400 μl ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងចីវលោកែវសម្រាប់ចំណីដោយប្រើបំពង់ Pasteur (Fisherbrand, Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ហើយដង្កូវពេញវ័យត្រូវបានអនុញ្ញាតឱ្យបង្ហូរយ៉ាងហោចណាស់មួយម៉ោង។ បន្ទាប់មកដង្កូវញីមានផ្ទៃពោះត្រូវបានផ្តល់ដំណោះស្រាយ sucrose 10% ហើយអនុញ្ញាតឱ្យពងនៅលើក្រដាសតម្រងសើមដែលតម្រង់ជួរក្នុងពែង soufflé ថ្លាខ្លាំងនីមួយៗ (ទំហំ 1.25 fl oz, Dart Container Corp., Mason, MI, USA)។ ទ្រុងជាមួយទឹក។ ដាក់ក្រដាសតម្រងដែលមានពងនៅក្នុងថង់បិទជិត (SC Johnsons, Racine, WI) ហើយរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 26°C។ ពងត្រូវបានញាស់ ហើយដង្កូវប្រហែល 200–250 ក្បាលត្រូវបានចិញ្ចឹមនៅក្នុងថាសប្លាស្ទិកដែលមានល្បាយនៃមាន់ទន្សាយ (ZuPreem, Premium Natural Products, Inc., Mission, KS, USA) និងម្សៅថ្លើម (MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, USA) និងសាច់ត្រី (TetraMin, Tetra GMPH, Meer, Germany) ក្នុងសមាមាត្រ 2:1:1។ ដង្កូវដំណាក់កាលទីបីចុងត្រូវបានប្រើក្នុងជីវវិភាគរបស់យើង។
សម្ភារៈគ្រាប់ពូជរុក្ខជាតិដែលប្រើក្នុងការសិក្សានេះទទួលបានពីប្រភពពាណិជ្ជកម្ម និងរដ្ឋាភិបាលដូចខាងក្រោម៖ Brassica juncea (ស្ពៃខ្មៅពណ៌ត្នោត-Pacific Gold) និង Brassica juncea (ស្ពៃខ្មៅពណ៌ស-Ida Gold) ពីសហករណ៍កសិករប៉ាស៊ីហ្វិកភាគពាយ័ព្យ រដ្ឋវ៉ាស៊ីនតោន សហរដ្ឋអាមេរិក; (ស្ពៃក្តោបសួនច្បារ) ពីក្រុមហ៊ុន Kelly Seed and Hardware Co., Peoria, IL, សហរដ្ឋអាមេរិក និង Thlaspi arvense (Field Pennycress-Elisabeth) ពី USDA-ARS, Peoria, IL, សហរដ្ឋអាមេរិក; គ្មានគ្រាប់ពូជណាមួយដែលប្រើក្នុងការសិក្សានេះត្រូវបានព្យាបាលដោយថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតទេ។ សម្ភារៈគ្រាប់ពូជទាំងអស់ត្រូវបានកែច្នៃ និងប្រើប្រាស់ក្នុងការសិក្សានេះស្របតាមបទប្បញ្ញត្តិក្នុងស្រុក និងជាតិ និងស្របតាមបទប្បញ្ញត្តិរដ្ឋ និងជាតិក្នុងស្រុកពាក់ព័ន្ធទាំងអស់។ ការសិក្សានេះមិនបានពិនិត្យមើលពូជរុក្ខជាតិប្តូរហ្សែនទេ។
គ្រាប់ Brassica juncea (PG), Alfalfa (Ls), White mustard (IG), Thlaspi arvense (DFP) ត្រូវបានកិនជាម្សៅល្អិតៗដោយប្រើម៉ាស៊ីនកិនបង្វិល Retsch ZM200 (Retsch, Haan, អាល្លឺម៉ង់) ដែលបំពាក់ដោយសំណាញ់ 0.75 mm និងរ៉ូទ័រដែកអ៊ីណុក ធ្មេញ 12 ល្បឿន 10,000 rpm (តារាងទី 1)។ ម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានកិនត្រូវបានផ្ទេរទៅស្រោមក្រដាស ហើយបន្សាបជាតិខ្លាញ់ជាមួយ hexane នៅក្នុងឧបករណ៍ Soxhlet រយៈពេល 24 ម៉ោង។ គំរូរងនៃ mustard វាលដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ត្រូវបានព្យាបាលដោយកំដៅនៅសីតុណ្ហភាព 100 °C រយៈពេល 1 ម៉ោង ដើម្បីបំផ្លាញ myrosinase និងការពារការ hydrolysis នៃ glucosinolates ដើម្បីបង្កើត isothiocyanates ដែលមានសកម្មភាពជីវសាស្រ្ត។ ម្សៅគ្រាប់ពូជកន្ទុយសេះដែលបានព្យាបាលដោយកំដៅ (DFP-HT) ត្រូវបានប្រើជាការគ្រប់គ្រងអវិជ្ជមានដោយការបំផ្លាញ myrosinase។
មាតិកាគ្លុយកូសស៊ីណូឡាតនៃម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ត្រូវបានកំណត់ជាបីដងដោយប្រើក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីរាវដំណើរការខ្ពស់ (HPLC) ស្របតាមពិធីការដែលបានបោះពុម្ពផ្សាយពីមុន 64។ ជាសង្ខេប មេតាណុល 3 មីលីលីត្រត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងគំរូម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ 250 មីលីក្រាម។ គំរូនីមួយៗត្រូវបានបញ្ចេញសំឡេងក្នុងអាងងូតទឹករយៈពេល 30 នាទី ហើយទុកចោលក្នុងទីងងឹតនៅសីតុណ្ហភាព 23°C រយៈពេល 16 ម៉ោង។ បន្ទាប់មក បរិមាណ 1 មីលីលីត្រនៃស្រទាប់សរីរាង្គត្រូវបានត្រងតាមតម្រង 0.45 μm ចូលទៅក្នុងឧបករណ៍យកសំណាកស្វ័យប្រវត្តិ។ ដំណើរការលើប្រព័ន្ធ Shimadzu HPLC (ស្នប់ LC 20AD ពីរ; ឧបករណ៍យកសំណាកស្វ័យប្រវត្តិ SIL 20A; ឧបករណ៍បន្សាបឧស្ម័ន DGU 20As; ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញា UV-VIS SPD-20A សម្រាប់ត្រួតពិនិត្យនៅ 237 nm; និងម៉ូឌុលឡានក្រុងទំនាក់ទំនង CBM-20A) មាតិកាគ្លុយកូសស៊ីណូឡាតនៃម្សៅគ្រាប់ពូជត្រូវបានកំណត់ជាបីដង។ ដោយប្រើកម្មវិធី Shimadzu LC Solution កំណែ 1.25 (Shimadzu Corporation, Columbia, MD, USA)។ ជួរឈរនេះគឺជាជួរឈរដំណាក់កាលបញ្ច្រាស C18 Inertsil (250 mm × 4.6 mm; RP C-18, ODS-3, 5u; GL Sciences, Torrance, CA, USA)។ លក្ខខណ្ឌដំណាក់កាលចល័តដំបូងត្រូវបានកំណត់នៅ 12% មេតាណុល/88% tetrabutylammonium hydroxide 0.01 M ក្នុងទឹក (TBAH; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ជាមួយនឹងអត្រាលំហូរ 1 mL/នាទី។ បន្ទាប់ពីចាក់សំណាក 15 μl លក្ខខណ្ឌដំបូងត្រូវបានរក្សារយៈពេល 20 នាទី ហើយបន្ទាប់មកសមាមាត្រសារធាតុរំលាយត្រូវបានកែតម្រូវទៅមេតាណុល 100% ជាមួយនឹងពេលវេលាវិភាគសំណាកសរុប 65 នាទី។ ខ្សែកោងស្តង់ដារ (ផ្អែកលើ nM/mAb) ត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការពនលាយជាបន្តបន្ទាប់នៃស្តង់ដារ sinapine, glucosinolate និង myrosin ដែលទើបរៀបចំថ្មីៗ (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ដើម្បីប៉ាន់ប្រមាណមាតិកាស្ពាន់ធ័រនៃម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់។ កំហាប់គ្លុយកូស៊ីណូឡេតនៅក្នុងគំរូត្រូវបានសាកល្បងលើ Agilent 1100 HPLC (Agilent, Santa Clara, CA, USA) ដោយប្រើកំណែ OpenLAB CDS ChemStation (C.01.07 SR2 [255]) ដែលបំពាក់ដោយជួរឈរដូចគ្នា និងប្រើវិធីសាស្ត្រដែលបានពិពណ៌នាពីមុន។ កំហាប់គ្លុយកូស៊ីណូឡេតត្រូវបានកំណត់។ អាចប្រៀបធៀបរវាងប្រព័ន្ធ HPLC។
អាលីលអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត (៩៤% ស្ថិរភាព) និងប៊ែនហ្សីលអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត (៩៨%) ត្រូវបានទិញពី Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)។ ៤-អ៊ីដ្រូស៊ីប៊ែនហ្សីលីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត ត្រូវបានទិញពី ChemCruz (Santa Cruz Biotechnology, CA, USA)។ នៅពេលដែលអង់ស៊ីមអ៊ីដ្រូលីសដោយមីរ៉ូស៊ីណាស គ្លូកូស៊ីណូឡាត គ្លូកូស៊ីណូឡាត និងគ្លូកូស៊ីណូឡាត បង្កើតបានជាអាលីលអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត ប៊ែនហ្សីលអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត និង៤-អ៊ីដ្រូស៊ីប៊ែនហ្សីលីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតរៀងៗខ្លួន។
ការវិភាគជីវសាស្ត្រមន្ទីរពិសោធន៍ត្រូវបានអនុវត្តតាមវិធីសាស្ត្ររបស់ Muturi et al. 32 ជាមួយនឹងការកែប្រែ។ ចំណីគ្រាប់ពូជដែលមានជាតិខ្លាញ់ទាបចំនួនប្រាំត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងការសិក្សានេះ៖ DFP, DFP-HT, IG, PG និង Ls។ ដង្កូវចំនួនម្ភៃក្បាលត្រូវបានដាក់ក្នុងប៊ីកឺរបីផ្លូវដែលអាចចោលបាន ៤០០ មីលីលីត្រ (VWR International, LLC, Radnor, PA, USA) ដែលមានទឹកដែលគ្មានអ៊ីយ៉ុងចំនួន ១២០ មីលីលីត្រ (dH2O)។ កំហាប់ម្សៅគ្រាប់ពូជចំនួនប្រាំពីរត្រូវបានធ្វើតេស្តសម្រាប់ជាតិពុលរបស់ដង្កូវមូស៖ ម្សៅគ្រាប់ពូជ ០,០១, ០,០២, ០,០៤, ០,០៦, ០,០៨, ០,១ និង ០,១២ ក្រាម/ម្សៅគ្រាប់ពូជ ១២០ មីលីលីត្រ dH2O សម្រាប់ម្សៅគ្រាប់ពូជ DFP, DFP-HT, IG និង PG។ ការវិភាគជីវសាស្ត្របឋមបង្ហាញថាម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls ដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់មានជាតិពុលច្រើនជាងម្សៅគ្រាប់ពូជចំនួនបួនផ្សេងទៀតដែលបានធ្វើតេស្ត។ ដូច្នេះ យើងបានកែតម្រូវកំហាប់ព្យាបាលទាំងប្រាំពីរនៃម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls ទៅជាកំហាប់ដូចខាងក្រោម៖ 0.015, 0.025, 0.035, 0.045, 0.055, 0.065 និង 0.075 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O។
ក្រុមត្រួតពិនិត្យដែលមិនបានព្យាបាល (dH20 គ្មានអាហារបំប៉នគ្រាប់ពូជ) ត្រូវបានរួមបញ្ចូលដើម្បីវាយតម្លៃអត្រាមរណភាពសត្វល្អិតធម្មតាក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃការវិភាគ។ ការវិភាគជីវសាស្ត្រពុលសម្រាប់អាហារគ្រាប់ពូជនីមួយៗរួមមានប៊ីកឺរបីជម្រាលចម្លងចំនួនបី (ដង្កូវដំណាក់កាលទីបីចុងចំនួន 20 ក្បាលក្នុងមួយប៊ីកឺរ) សម្រាប់ដបសរុបចំនួន 108 ។ ធុងដែលបានព្យាបាលត្រូវបានរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (20-21°C) ហើយអត្រាមរណភាពរបស់ដង្កូវត្រូវបានកត់ត្រាក្នុងអំឡុងពេល 24 និង 72 ម៉ោងនៃការប៉ះពាល់ជាបន្តបន្ទាប់ទៅនឹងកំហាប់នៃការព្យាបាល។ ប្រសិនបើរាងកាយ និងអវយវៈរបស់មូសមិនរើនៅពេលចាក់ ឬប៉ះជាមួយ spatula ដែកអ៊ីណុកស្តើង ដង្កូវមូសត្រូវបានចាត់ទុកថាស្លាប់។ ដង្កូវដែលងាប់ជាធម្មតានៅតែគ្មានចលនានៅក្នុងទីតាំងខ្នង ឬពោះនៅបាតធុង ឬនៅលើផ្ទៃទឹក។ ការពិសោធន៍ត្រូវបានធ្វើម្តងទៀតបីដងនៅថ្ងៃផ្សេងៗគ្នាដោយប្រើក្រុមដង្កូវផ្សេងៗគ្នា សម្រាប់ដង្កូវសរុបចំនួន 180 ក្បាលដែលបានប៉ះពាល់នឹងកំហាប់នៃការព្យាបាលនីមួយៗ។
ភាពពុលនៃ AITC, BITC និង 4-HBITC ចំពោះដង្កូវមូសត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើនីតិវិធីជីវវិភាគដូចគ្នា ប៉ុន្តែមានការព្យាបាលខុសៗគ្នា។ រៀបចំដំណោះស្រាយស្តុក 100,000 ppm សម្រាប់សារធាតុគីមីនីមួយៗ ដោយបន្ថែមសារធាតុគីមី 100 µL ទៅក្នុងអេតាណុលដាច់ខាត 900 µL ក្នុងបំពង់ centrifuge 2 មីលីលីត្រ ហើយអង្រួនរយៈពេល 30 វិនាទីដើម្បីលាយបញ្ចូលគ្នាឱ្យបានហ្មត់ចត់។ កំហាប់នៃការព្យាបាលត្រូវបានកំណត់ដោយផ្អែកលើជីវវិភាគបឋមរបស់យើង ដែលបានរកឃើញថា BITC មានជាតិពុលច្រើនជាង AITC និង 4-HBITC។ ដើម្បីកំណត់ជាតិពុល កំហាប់ BITC ចំនួន 5 (1, 3, 6, 9 និង 12 ppm) កំហាប់ AITC ចំនួន 7 (5, 10, 15, 20, 25, 30 និង 35 ppm) និងកំហាប់ 4-HBITC ចំនួន 6 (15, 15, 20, 25, 30 និង 35 ppm)។ (៣០, ៤៥, ៦០, ៧៥ និង ៩០ ppm)។ ការព្យាបាលត្រួតពិនិត្យត្រូវបានចាក់ជាមួយអេតាណុលដាច់ខាតចំនួន ១០៨ μL ដែលស្មើនឹងបរិមាណអតិបរមានៃការព្យាបាលគីមី។ ការវិភាគជីវសាស្រ្តត្រូវបានធ្វើម្តងទៀតដូចខាងលើ ដោយបង្ហាញចំនួនដង្កូវសរុបចំនួន ១៨០ ក្បាលក្នុងមួយកំហាប់នៃការព្យាបាល។ អត្រាមរណភាពរបស់ដង្កូវត្រូវបានកត់ត្រាសម្រាប់កំហាប់នីមួយៗនៃ AITC, BITC និង 4-HBITC បន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់ជាបន្តបន្ទាប់រយៈពេល ២៤ ម៉ោង។
ការវិភាគប្រូប៊ីតនៃទិន្នន័យមរណភាពទាក់ទងនឹងកម្រិតថ្នាំចំនួន 65 ត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើកម្មវិធី Polo (Polo Plus, LeOra Software, កំណែ 1.0) ដើម្បីគណនាកំហាប់សម្លាប់ 50% (LC50), កំហាប់សម្លាប់ 90% (LC90), ជម្រាល, មេគុណកម្រិតថ្នាំសម្លាប់ និងកំហាប់សម្លាប់ 95%។ ដោយផ្អែកលើចន្លោះជឿជាក់សម្រាប់សមាមាត្រកម្រិតថ្នាំសម្លាប់សម្រាប់កំហាប់ដែលបានបំលែងឡូហ្គ្យា និងខ្សែកោងកម្រិតថ្នាំ-មរណភាព។ ទិន្នន័យមរណភាពគឺផ្អែកលើទិន្នន័យចម្លងរួមបញ្ចូលគ្នានៃដង្កូវចំនួន 180 ក្បាលដែលប៉ះពាល់នឹងកំហាប់ព្យាបាលនីមួយៗ។ ការវិភាគប្រូបាប៊ីលីតេត្រូវបានអនុវត្តដោយឡែកពីគ្នាសម្រាប់ម្សៅគ្រាប់ពូជនីមួយៗ និងសមាសធាតុគីមីនីមួយៗ។ ដោយផ្អែកលើចន្លោះជឿជាក់ 95% នៃសមាមាត្រកម្រិតថ្នាំសម្លាប់ ភាពពុលនៃម្សៅគ្រាប់ពូជ និងសមាសធាតុគីមីចំពោះដង្កូវមូសត្រូវបានគេចាត់ទុកថាខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ ដូច្នេះចន្លោះជឿជាក់ដែលមានតម្លៃ 1 មិនមានភាពខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់ទេ P = 0.0566។
លទ្ធផល HPLC សម្រាប់ការកំណត់គ្លុយកូស៊ីណូឡាតសំខាន់ៗនៅក្នុងម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ DFP, IG, PG និង Ls ត្រូវបានរាយក្នុងតារាងទី 1។ គ្លុយកូស៊ីណូឡាតសំខាន់ៗនៅក្នុងម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានធ្វើតេស្តមានភាពខុសប្លែកគ្នាលើកលែងតែ DFP និង PG ដែលទាំងពីរមានផ្ទុកសារធាតុ myrosinase glucosinolates។ មាតិកា myrosinin នៅក្នុង PG គឺខ្ពស់ជាងនៅក្នុង DFP 33.3 ± 1.5 និង 26.5 ± 0.9 មីលីក្រាម/ក្រាម រៀងគ្នា។ ម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls មានផ្ទុកគ្លុយកូគ្លីកូន 36.6 ± 1.2 មីលីក្រាម/ក្រាម ចំណែកឯម្សៅគ្រាប់ពូជ IG មានផ្ទុកស៊ីណាពីន 38.0 ± 0.5 មីលីក្រាម/ក្រាម។
ដង្កូវរបស់មូស Aedes aegypti ត្រូវបានសម្លាប់នៅពេលព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ ទោះបីជាប្រសិទ្ធភាពនៃការព្យាបាលប្រែប្រួលអាស្រ័យលើប្រភេទរុក្ខជាតិក៏ដោយ។ មានតែ DFP-NT ប៉ុណ្ណោះដែលមិនមានជាតិពុលដល់ដង្កូវមូសបន្ទាប់ពីការប៉ះពាល់ 24 និង 72 ម៉ោង (តារាងទី 2)។ ជាតិពុលនៃម្សៅគ្រាប់ពូជសកម្មបានកើនឡើងជាមួយនឹងកំហាប់កើនឡើង (រូបភាពទី 1A, B)។ ជាតិពុលនៃម្សៅគ្រាប់ពូជចំពោះដង្កូវមូសប្រែប្រួលគួរឱ្យកត់សម្គាល់ដោយផ្អែកលើ 95% CI នៃសមាមាត្រកម្រិតថ្នាំសម្លាប់នៃតម្លៃ LC50 នៅការវាយតម្លៃ 24 ម៉ោង និង 72 ម៉ោង (តារាងទី 3)។ បន្ទាប់ពី 24 ម៉ោង ឥទ្ធិពលពុលនៃម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls គឺធំជាងការព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជផ្សេងទៀត ជាមួយនឹងសកម្មភាពខ្ពស់បំផុត និងជាតិពុលអតិបរមាចំពោះដង្កូវ (LC50 = 0.04 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O)។ ដង្កូវមានភាពរសើបតិចជាងមុនចំពោះ DFP នៅរយៈពេល 24 ម៉ោងបើធៀបនឹងការព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជ IG, Ls និង PG ដោយមានតម្លៃ LC50 0.115, 0.04 និង 0.08 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O រៀងគ្នា ដែលខ្ពស់ជាងតម្លៃ LC50 តាមស្ថិតិ។ 0.211 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O (តារាងទី 3)។ តម្លៃ LC90 នៃ DFP, IG, PG និង Ls គឺ 0.376, 0.275, 0.137 និង 0.074 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O រៀងគ្នា (តារាងទី 2)។ កំហាប់ DPP ខ្ពស់បំផុតគឺ 0.12 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O។ បន្ទាប់ពីការវាយតម្លៃរយៈពេល 24 ម៉ោង អត្រាមរណភាពជាមធ្យមរបស់ដង្កូវមានត្រឹមតែ 12% ប៉ុណ្ណោះ ខណៈដែលអត្រាមរណភាពជាមធ្យមរបស់ដង្កូវ IG និង PG ឈានដល់ 51% និង 82% រៀងគ្នា។ ក្រោយពីការវាយតម្លៃរយៈពេល 24 ម៉ោង អត្រាមរណភាពជាមធ្យមរបស់ដង្កូវសម្រាប់ការព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls ដែលមានកំហាប់ខ្ពស់បំផុត (0.075 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O) គឺ 99% (រូបភាពទី 1A)។
ខ្សែកោងអត្រាមរណភាពត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណពីការឆ្លើយតបនៃកម្រិតថ្នាំ (Probit) របស់ដង្កូវ Ae. អេហ្ស៊ីប (ដង្កូវដំណាក់កាលទី 3) ទៅនឹងកំហាប់ម្សៅគ្រាប់ពូជ 24 ម៉ោង (A) និង 72 ម៉ោង (B) បន្ទាប់ពីការព្យាបាល។ ខ្សែចំនុចតំណាងឱ្យ LC50 នៃការព្យាបាលម្សៅគ្រាប់ពូជ។ DFP Thlaspi arvense, DFP-HT Thlaspi arvense ដែលត្រូវបានធ្វើឱ្យអសកម្មដោយកំដៅ, IG Sinapsis alba (Ida Gold), PG Brassica juncea (Pacific Gold), Ls Lepidium sativum។
នៅពេលវាយតម្លៃរយៈពេល 72 ម៉ោង តម្លៃ LC50 នៃម្សៅគ្រាប់ពូជ DFP, IG និង PG គឺ 0.111, 0.085 និង 0.051 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O រៀងគ្នា។ ដង្កូវស្ទើរតែទាំងអស់ដែលប៉ះពាល់នឹងម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls បានងាប់បន្ទាប់ពីប៉ះពាល់រយៈពេល 72 ម៉ោង ដូច្នេះទិន្នន័យមរណភាពមិនស៊ីសង្វាក់គ្នាជាមួយនឹងការវិភាគ Probit ទេ។ បើប្រៀបធៀបទៅនឹងម្សៅគ្រាប់ពូជផ្សេងទៀត ដង្កូវមានភាពរសើបតិចជាងចំពោះការព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជ DFP ហើយមានតម្លៃ LC50 ខ្ពស់ជាងតាមស្ថិតិ (តារាងទី 2 និងទី 3)។ បន្ទាប់ពី 72 ម៉ោង តម្លៃ LC50 សម្រាប់ការព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជ DFP, IG និង PG ត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណថាមាន 0.111, 0.085 និង 0.05 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O រៀងគ្នា។ បន្ទាប់ពីវាយតម្លៃរយៈពេល 72 ម៉ោង តម្លៃ LC90 នៃម្សៅគ្រាប់ពូជ DFP, IG និង PG គឺ 0.215, 0.254 និង 0.138 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O រៀងគ្នា។ បន្ទាប់ពីការវាយតម្លៃរយៈពេល 72 ម៉ោង អត្រាមរណភាពជាមធ្យមរបស់ដង្កូវសម្រាប់ការព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជ DFP, IG និង PG នៅកំហាប់អតិបរមា 0.12 ក្រាម/120 មីលីលីត្រ dH2O គឺ 58%, 66% និង 96% រៀងគ្នា (រូបភាពទី 1B)។ បន្ទាប់ពីការវាយតម្លៃរយៈពេល 72 ម៉ោង ម្សៅគ្រាប់ពូជ PG ត្រូវបានគេរកឃើញថាមានជាតិពុលច្រើនជាងម្សៅគ្រាប់ពូជ IG និង DFP។
អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតសំយោគ អាលីលអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត (AITC) ប៊ែនហ្សីលអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត (BITC) និង 4-អ៊ីដ្រូស៊ីប៊ែនហ្សីលីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត (4-HBITC) អាចសម្លាប់ដង្កូវមូសបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព។ នៅ 24 ម៉ោងបន្ទាប់ពីការព្យាបាល BITC មានជាតិពុលច្រើនជាងចំពោះដង្កូវ ជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 5.29 ppm បើប្រៀបធៀបទៅនឹង 19.35 ppm សម្រាប់ AITC និង 55.41 ppm សម្រាប់ 4-HBITC (តារាងទី 4)។ បើប្រៀបធៀបទៅនឹង AITC និង BITC 4-HBITC មានជាតិពុលទាបជាង និងតម្លៃ LC50 ខ្ពស់ជាង។ មានភាពខុសគ្នាគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៅក្នុងជាតិពុលដង្កូវមូសនៃអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតសំខាន់ពីរ (Ls និង PG) នៅក្នុងម្សៅគ្រាប់ពូជដ៏មានឥទ្ធិពលបំផុត។ ភាពពុលដោយផ្អែកលើសមាមាត្រកម្រិតថ្នាំសម្លាប់សត្វនៃតម្លៃ LC50 រវាង AITC, BITC និង 4-HBITC បានបង្ហាញពីភាពខុសគ្នាខាងស្ថិតិ ដែល CI 95% នៃសមាមាត្រកម្រិតថ្នាំសម្លាប់សត្វ LC50 មិនរាប់បញ្ចូលតម្លៃ 1 (P = 0.05, តារាងទី 4)។ កំហាប់ខ្ពស់បំផុតនៃទាំង BITC និង AITC ត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណថាសម្លាប់ដង្កូវ 100% ដែលត្រូវបានសាកល្បង (រូបភាពទី 2)។
ខ្សែកោងអត្រាមរណភាពត្រូវបានប៉ាន់ប្រមាណចេញពីការឆ្លើយតបនៃកម្រិតថ្នាំ (Probit) របស់ Ae។ 24 ម៉ោងបន្ទាប់ពីការព្យាបាល ដង្កូវអេហ្ស៊ីប (ដង្កូវដំណាក់កាលទី 3) បានឈានដល់កំហាប់អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតសំយោគ។ ខ្សែចំនុចតំណាងឱ្យ LC50 សម្រាប់ការព្យាបាលដោយអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត។ Benzyl isothiocyanate BITC, allyl isothiocyanate AITC និង 4-HBITC។
ការប្រើប្រាស់ថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតជីវសាស្ត្ររុក្ខជាតិជាភ្នាក់ងារគ្រប់គ្រងមូសត្រូវបានសិក្សាជាយូរមកហើយ។ រុក្ខជាតិជាច្រើនផលិតសារធាតុគីមីធម្មជាតិដែលមានសកម្មភាពសម្លាប់សត្វល្អិត37។ សមាសធាតុជីវសកម្មរបស់វាផ្តល់នូវជម្រើសដ៏ទាក់ទាញមួយជំនួសឱ្យថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសំយោគដែលមានសក្តានុពលដ៏អស្ចារ្យក្នុងការគ្រប់គ្រងសត្វល្អិត រួមទាំងមូសផងដែរ។
រុក្ខជាតិស្ពៃខ្មៅត្រូវបានដាំដុះជាដំណាំសម្រាប់គ្រាប់ពូជរបស់វា ដែលត្រូវបានប្រើជាគ្រឿងទេស និងជាប្រភពប្រេង។ នៅពេលដែលប្រេងស្ពៃខ្មៅត្រូវបានស្រង់ចេញពីគ្រាប់ពូជ ឬនៅពេលដែលស្ពៃខ្មៅត្រូវបានស្រង់ចេញសម្រាប់ប្រើជាឥន្ធនៈជីវภาพ 69 ផលិតផលរងគឺជាម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់។ ម្សៅគ្រាប់ពូជនេះរក្សាបាននូវសមាសធាតុជីវគីមីធម្មជាតិជាច្រើនរបស់វា និងអង់ស៊ីមអ៊ីដ្រូលីទិក។ ជាតិពុលនៃម្សៅគ្រាប់ពូជនេះត្រូវបានសន្មតថាជាការផលិតអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត 55,60,61។ អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការរំលាយគ្លូកូស៊ីណូឡាតដោយអង់ស៊ីមមីរ៉ូស៊ីណាសក្នុងអំឡុងពេលផ្តល់ជាតិទឹកដល់ម្សៅគ្រាប់ពូជ 38,55,70 ហើយត្រូវបានគេដឹងថាមានឥទ្ធិពលសម្លាប់ផ្សិត សម្លាប់បាក់តេរី សម្លាប់ណេម៉ាទីស និងសម្លាប់សត្វល្អិត ក៏ដូចជាលក្ខណៈសម្បត្តិផ្សេងទៀតរួមទាំងឥទ្ធិពលញ្ញាណគីមី និងលក្ខណៈសម្បត្តិគីមីព្យាបាល 61,62,70។ ការសិក្សាជាច្រើនបានបង្ហាញថា រុក្ខជាតិស្ពៃខ្មៅ និងម្សៅគ្រាប់ពូជដើរតួយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាពជាសារធាតុសម្លាប់សត្វល្អិតប្រឆាំងនឹងដី និងសត្វល្អិតដែលរក្សាទុក 57,59,71,72។ នៅក្នុងការសិក្សានេះ យើងបានវាយតម្លៃពីជាតិពុលនៃម្សៅគ្រាប់បួនគ្រាប់ និងផលិតផលជីវសកម្មទាំងបីរបស់វាគឺ AITC, BITC និង 4-HBITC ចំពោះដង្កូវមូស Aedes។ Aedes aegypti។ ការបន្ថែមម្សៅគ្រាប់ដោយផ្ទាល់ទៅក្នុងទឹកដែលមានដង្កូវមូសត្រូវបានគេរំពឹងថានឹងធ្វើឱ្យដំណើរការអង់ស៊ីមសកម្មដែលផលិតអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតដែលមានជាតិពុលដល់ដង្កូវមូស។ ការបំប្លែងជីវសាស្រ្តនេះត្រូវបានបង្ហាញដោយផ្នែកដោយសកម្មភាពសម្លាប់ដង្កូវដែលសង្កេតឃើញនៃម្សៅគ្រាប់ និងការបាត់បង់សកម្មភាពសម្លាប់សត្វល្អិតនៅពេលដែលម្សៅគ្រាប់ស្ពៃខ្មៅតឿត្រូវបានព្យាបាលដោយកំដៅមុនពេលប្រើប្រាស់។ ការព្យាបាលដោយកំដៅត្រូវបានគេរំពឹងថានឹងបំផ្លាញអង់ស៊ីមអ៊ីដ្រូលីទិកដែលធ្វើឱ្យ glucosinolates សកម្ម ដោយហេតុនេះការពារការបង្កើតអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតជីវសកម្ម។ នេះគឺជាការសិក្សាលើកដំបូងដើម្បីបញ្ជាក់ពីលក្ខណៈសម្បត្តិសម្លាប់សត្វល្អិតនៃម្សៅគ្រាប់ស្ពៃក្តោបប្រឆាំងនឹងមូសនៅក្នុងបរិស្ថានទឹក។
ក្នុងចំណោមម្សៅគ្រាប់ពូជដែលបានធ្វើតេស្ត ម្សៅគ្រាប់ពូជស្ពៃទឹក (Ls) គឺជាសារធាតុពុលបំផុត ដែលបណ្តាលឱ្យមានអត្រាមរណភាពខ្ពស់របស់សត្វមូស Aedes albopictus។ ដង្កូវ Aedes aegypti ត្រូវបានកែច្នៃជាបន្តបន្ទាប់រយៈពេល 24 ម៉ោង។ ម្សៅគ្រាប់ពូជបីដែលនៅសល់ (PG, IG និង DFP) មានសកម្មភាពយឺតជាង ហើយនៅតែបណ្តាលឱ្យមានអត្រាមរណភាពខ្ពស់បន្ទាប់ពីការព្យាបាលជាបន្តបន្ទាប់រយៈពេល 72 ម៉ោង។ មានតែម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls ប៉ុណ្ណោះដែលមានផ្ទុក glucosinolates ក្នុងបរិមាណច្រើន ខណៈដែល PG និង DFP មានផ្ទុក myrosinase និង IG មានផ្ទុក glucosinolate ជា glucosinolate សំខាន់ (តារាងទី 1)។ Glucotropaeolin ត្រូវបាន hydrolyzed ទៅ BITC និង sinalbine ត្រូវបាន hydrolyzed ទៅ 4-HBITC61,62។ លទ្ធផលជីវសាស្រ្តរបស់យើងបង្ហាញថា ទាំងម្សៅគ្រាប់ពូជ Ls និង BITC សំយោគមានជាតិពុលខ្ពស់ចំពោះដង្កូវមូស។ សមាសធាតុសំខាន់នៃម្សៅគ្រាប់ពូជ PG និង DFP គឺ myrosinase glucosinolate ដែលត្រូវបាន hydrolyzed ទៅ AITC។ AITC មានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការសម្លាប់ដង្កូវមូសជាមួយនឹងតម្លៃ LC50 19.35 ppm។ បើប្រៀបធៀបទៅនឹង AITC និង BITC 4-HBITC isothiocyanate មានជាតិពុលតិចបំផុតចំពោះដង្កូវ។ ទោះបីជា AITC មានជាតិពុលតិចជាង BITC ក៏ដោយ តម្លៃ LC50 របស់វាទាបជាងប្រេងសំខាន់ៗជាច្រើនដែលត្រូវបានសាកល្បងលើដង្កូវមូស 32,73,74,75។
ម្សៅគ្រាប់ពូជ cruciferous របស់យើងសម្រាប់ប្រើប្រឆាំងនឹងដង្កូវមូសមានផ្ទុក glucosinolate សំខាន់មួយ ដែលមានចំនួនជាង 98-99% នៃ glucosinolates សរុប ដូចដែលបានកំណត់ដោយ HPLC។ បរិមាណ glucosinolates ផ្សេងទៀតត្រូវបានរកឃើញ ប៉ុន្តែកម្រិតរបស់វាតិចជាង 0.3% នៃ glucosinolates សរុប។ ម្សៅគ្រាប់ពូជ Watercress (L. sativum) មានផ្ទុក glucosinolates បន្ទាប់បន្សំ (sinigrin) ប៉ុន្តែសមាមាត្ររបស់វាគឺ 1% នៃ glucosinolates សរុប ហើយមាតិការបស់វានៅតែមិនសំខាន់ (ប្រហែល 0.4 mg/g ម្សៅគ្រាប់ពូជ)។ ទោះបីជា PG និង DFP មានផ្ទុក glucosinolate សំខាន់ដូចគ្នា (myrosin) ក៏ដោយ សកម្មភាពសម្លាប់ដង្កូវនៃអាហារគ្រាប់ពូជរបស់វាខុសគ្នាយ៉ាងខ្លាំងដោយសារតែតម្លៃ LC50 របស់វា។ មានភាពខុសប្លែកគ្នាក្នុងការពុលចំពោះផ្សិតម្សៅ។ ការលេចឡើងនៃដង្កូវ Aedes aegypti អាចបណ្តាលមកពីភាពខុសគ្នានៃសកម្មភាព myrosinase ឬស្ថេរភាពរវាងចំណីគ្រាប់ពូជទាំងពីរ។ សកម្មភាព Myrosinase ដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់នៅក្នុងជីវភាពនៃផលិតផល hydrolysis ដូចជា isothiocyanates នៅក្នុងរុក្ខជាតិ Brassicaceae76។ របាយការណ៍មុនៗដោយ Pocock et al.77 និង Wilkinson et al.78 បានបង្ហាញថាការផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាព និងស្ថេរភាពរបស់ myrosinase ក៏អាចជាប់ទាក់ទងនឹងកត្តាហ្សែន និងបរិស្ថានផងដែរ។
មាតិកាអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតជីវសកម្មដែលរំពឹងទុកត្រូវបានគណនាដោយផ្អែកលើតម្លៃ LC50 នៃម្សៅគ្រាប់ពូជនីមួយៗនៅម៉ោង 24 និង 72 (តារាងទី 5) សម្រាប់ការប្រៀបធៀបជាមួយនឹងការប្រើប្រាស់គីមីដែលត្រូវគ្នា។ បន្ទាប់ពី 24 ម៉ោង អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតនៅក្នុងម្សៅគ្រាប់ពូជមានជាតិពុលច្រើនជាងសមាសធាតុសុទ្ធ។ តម្លៃ LC50 ដែលគណនាដោយផ្អែកលើផ្នែកក្នុងមួយលាន (ppm) នៃការព្យាបាលគ្រាប់ពូជអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតគឺទាបជាងតម្លៃ LC50 សម្រាប់ការប្រើប្រាស់ BITC, AITC និង 4-HBITC។ យើងបានសង្កេតឃើញដង្កូវស៊ីគ្រាប់ម្សៅគ្រាប់ពូជ (រូបភាពទី 3A)។ ជាលទ្ធផល ដង្កូវអាចទទួលបានការប៉ះពាល់នឹងអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតពុលកាន់តែច្រើនដោយការលេបគ្រាប់ម្សៅគ្រាប់ពូជ។ នេះជាក់ស្តែងបំផុតនៅក្នុងការព្យាបាលម្សៅគ្រាប់ពូជ IG និង PG នៅពេលប៉ះពាល់ 24 ម៉ោង ដែលកំហាប់ LC50 ទាបជាង 75% និង 72% ជាងការព្យាបាល AITC និង 4-HBITC សុទ្ធរៀងៗខ្លួន។ ការព្យាបាលដោយ Ls និង DFP មានជាតិពុលច្រើនជាង isothiocyanate សុទ្ធ ដោយតម្លៃ LC50 ទាបជាង 24% និង 41% រៀងគ្នា។ ដង្កូវនៅក្នុងការព្យាបាលត្រួតពិនិត្យបានភ្ញាស់ដោយជោគជ័យ (រូបភាពទី 3B) ខណៈពេលដែលដង្កូវភាគច្រើននៅក្នុងការព្យាបាលម្សៅគ្រាប់ពូជមិនបានភ្ញាស់ទេ ហើយការអភិវឌ្ឍដង្កូវត្រូវបានពន្យារពេលគួរឱ្យកត់សម្គាល់ (រូបភាពទី 3B,D)។ នៅក្នុង Spodopteralitura, isothiocyanates ត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការយឺតយ៉ាវនៃការលូតលាស់ និងការពន្យាពេលនៃការអភិវឌ្ឍ79។
ដង្កូវរបស់មូស Aedes aegypti ត្រូវបានប៉ះពាល់ជាបន្តបន្ទាប់ទៅនឹងម្សៅគ្រាប់ពូជ Brassica រយៈពេល 24-72 ម៉ោង។ (ក) ដង្កូវងាប់ជាមួយនឹងភាគល្អិតនៃម្សៅគ្រាប់ពូជនៅក្នុងមាត់ (គូសរង្វង់); (ខ) ការព្យាបាលត្រួតពិនិត្យ (dH20 ដោយមិនបន្ថែមម្សៅគ្រាប់ពូជ) បង្ហាញថាដង្កូវលូតលាស់ធម្មតា ហើយចាប់ផ្តើមក្លាយជាដង្កូវបន្ទាប់ពី 72 ម៉ោង (គ, ឃ) ដង្កូវដែលត្រូវបានព្យាបាលដោយម្សៅគ្រាប់ពូជ; ម្សៅគ្រាប់ពូជបានបង្ហាញពីភាពខុសគ្នានៃការអភិវឌ្ឍ ហើយមិនបានក្លាយជាដង្កូវទេ។
យើងមិនទាន់បានសិក្សាពីយន្តការនៃផលប៉ះពាល់ពុលរបស់អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតលើដង្កូវមូសនៅឡើយទេ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការសិក្សាពីមុនៗលើស្រមោចភ្លើងក្រហម (Solenopsis invicta) បានបង្ហាញថា ការរារាំងអង់ស៊ីម glutathione S-transferase (GST) និង esterase (EST) គឺជាយន្តការសំខាន់នៃសកម្មភាពជីវសាស្ត្ររបស់អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាត ហើយ AITC សូម្បីតែសកម្មភាពទាបក៏ដោយ ក៏អាចរារាំងសកម្មភាព GST ផងដែរ។ កម្រិតថ្នាំគឺ 0.5 µg/ml80។ ផ្ទុយទៅវិញ AITC រារាំងអាសេទីលកូលីនអេស្តេរ៉ាសនៅក្នុងដង្កូវពោតពេញវ័យ (Sitophilus zeamais)81។ ការសិក្សាស្រដៀងគ្នានេះត្រូវតែអនុវត្តដើម្បីបញ្ជាក់ពីយន្តការនៃសកម្មភាពរបស់អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតនៅក្នុងដង្កូវមូស។
យើងប្រើការព្យាបាលដោយប្រើ DFP ដែលត្រូវបានធ្វើឱ្យអសកម្មដោយកំដៅ ដើម្បីគាំទ្រសំណើដែលថា ការបំបែកដោយទឹកនៃគ្លូកូស៊ីណូឡាតរុក្ខជាតិ ដើម្បីបង្កើតជាអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតដែលមានប្រតិកម្ម បម្រើជាយន្តការសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងដង្កូវមូសដោយម្សៅគ្រាប់ស្ពៃក្តោប។ ម្សៅគ្រាប់ DFP-HT មិនមានជាតិពុលនៅអត្រានៃការប្រើប្រាស់ដែលបានសាកល្បងនោះទេ។ Lafarga et al. 82 បានរាយការណ៍ថា គ្លូកូស៊ីណូឡាតមានភាពរសើបចំពោះការរិចរិលនៅសីតុណ្ហភាពខ្ពស់។ ការព្យាបាលដោយប្រើកំដៅក៏ត្រូវបានគេរំពឹងថានឹងធ្វើឱ្យអង់ស៊ីម myrosinase នៅក្នុងម្សៅគ្រាប់ខូចទ្រង់ទ្រាយ និងការពារការបំបែកដោយទឹកនៃគ្លូកូស៊ីណូឡាត ដើម្បីបង្កើតជាអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតដែលមានប្រតិកម្ម។ នេះក៏ត្រូវបានបញ្ជាក់ដោយ Okunade et al. 75 បានបង្ហាញថា myrosinase មានភាពរសើបចំពោះសីតុណ្ហភាព ដែលបង្ហាញថាសកម្មភាព myrosinase ត្រូវបានធ្វើឱ្យអសកម្មទាំងស្រុង នៅពេលដែលគ្រាប់ស្ពៃក្តោប ស្ពៃខ្មៅ និងគ្រាប់ bloodroot ត្រូវបានប៉ះពាល់នឹងសីតុណ្ហភាពលើសពី 80°C។ យន្តការទាំងនេះអាចបណ្តាលឱ្យបាត់បង់សកម្មភាពសម្លាប់សត្វល្អិតនៃម្សៅគ្រាប់ DFP ដែលបានព្យាបាលដោយកំដៅ។
ដូច្នេះ ម្សៅគ្រាប់ស្ពៃខ្មៅ និងសារធាតុ isothiocyanates សំខាន់ៗចំនួនបីរបស់វាគឺមានជាតិពុលដល់ដង្កូវមូស។ ដោយសារភាពខុសគ្នារវាងម្សៅគ្រាប់ពូជ និងការព្យាបាលដោយគីមី ការប្រើប្រាស់ម្សៅគ្រាប់ពូជអាចជាវិធីសាស្ត្រដ៏មានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការគ្រប់គ្រងមូស។ មានតម្រូវការក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណរូបមន្តសមស្រប និងប្រព័ន្ធចែកចាយដែលមានប្រសិទ្ធភាព ដើម្បីបង្កើនប្រសិទ្ធភាព និងស្ថេរភាពនៃការប្រើប្រាស់ម្សៅគ្រាប់ពូជ។ លទ្ធផលរបស់យើងបង្ហាញពីសក្តានុពលនៃការប្រើប្រាស់ម្សៅគ្រាប់ស្ពៃខ្មៅជាជម្រើសមួយជំនួសថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតសំយោគ។ បច្ចេកវិទ្យានេះអាចក្លាយជាឧបករណ៍ច្នៃប្រឌិតសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងវ៉ិចទ័រមូស។ ដោយសារតែដង្កូវមូសលូតលាស់នៅក្នុងបរិស្ថានទឹក ហើយម្សៅគ្រាប់គ្លូកូស៊ីណូឡាតត្រូវបានបំលែងដោយអង់ស៊ីមទៅជាអ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតសកម្មនៅពេលទទួលបានជាតិទឹក ការប្រើប្រាស់ម្សៅគ្រាប់ស្ពៃខ្មៅក្នុងទឹកដែលមានមូសច្រើនផ្តល់នូវសក្តានុពលនៃការគ្រប់គ្រងយ៉ាងសំខាន់។ ទោះបីជាសកម្មភាពសម្លាប់ដង្កូវរបស់អ៊ីសូធីអូស៊ីយ៉ាណាតប្រែប្រួល (BITC > AITC > 4-HBITC) ក៏ដោយ ក៏ត្រូវការការស្រាវជ្រាវបន្ថែមទៀតដើម្បីកំណត់ថាតើការផ្សំម្សៅគ្រាប់ពូជជាមួយសារធាតុ glucosinolates ច្រើនបង្កើនជាតិពុលរួមគ្នាឬអត់។ នេះជាការសិក្សាលើកដំបូងដើម្បីបង្ហាញពីផលប៉ះពាល់សម្លាប់សត្វល្អិតនៃម្សៅគ្រាប់ស្ពៃខ្មៅដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ និងសារធាតុ isothiocyanates ជីវសកម្មចំនួនបីលើមូស។ លទ្ធផលនៃការសិក្សានេះ បានបើកផ្លូវថ្មីមួយដោយបង្ហាញថា ម្សៅគ្រាប់ស្ពៃក្តោបដែលបានបន្សាបជាតិខ្លាញ់ ដែលជាផលិតផលរងនៃការទាញយកប្រេងចេញពីគ្រាប់ពូជ អាចបម្រើជាភ្នាក់ងារសម្លាប់ដង្កូវដ៏ជោគជ័យមួយសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងមូស។ ព័ត៌មាននេះអាចជួយជំរុញការរកឃើញភ្នាក់ងារជីវសាស្រ្តរុក្ខជាតិ និងការអភិវឌ្ឍរបស់វាជាថ្នាំសម្លាប់សត្វល្អិតជីវសាស្រ្តដែលមានតម្លៃថោក ជាក់ស្តែង និងមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថាន។
សំណុំទិន្នន័យដែលបង្កើតឡើងសម្រាប់ការសិក្សានេះ និងការវិភាគលទ្ធផលអាចរកបានពីអ្នកនិពន្ធដែលត្រូវគ្នាតាមការស្នើសុំសមហេតុផល។ នៅចុងបញ្ចប់នៃការសិក្សា សម្ភារៈទាំងអស់ដែលប្រើក្នុងការសិក្សា (សត្វល្អិត និងម្សៅគ្រាប់ពូជ) ត្រូវបានបំផ្លាញចោល។
ពេលវេលាបង្ហោះ៖ ថ្ងៃទី ២៩ ខែកក្កដា ឆ្នាំ ២០២៤